LRRC4-AP2/SP1-miR182-LRRC4和LRRC4-miR-185-DNMT1-LRRC4调控环路在脑胶质瘤中相互调控的机制研究

LRRC4是我室自主克隆的脑胶质瘤抑瘤基因，可通过多条信号转导通路和表观遗传学修饰参与脑胶质瘤细胞生物学功能的调控。近年来，随着miRNA研究的进展，使得基因、转录因子、甲基化修饰的调控关系更为复杂。本课题前期通过miRNA表达谱芯片的筛选和验证，发现过表达LRRC4后miR-182显著下调，miR-185显著上调；miR-182直接靶向LRRC4、miR-185直接靶向DNMT1参与胶质瘤细胞的生长和侵袭。本项目拟在前期研究工作的基础上，进一步明确LRRC4作为脑胶质瘤抑瘤基因的功能机制，通过证实LRRC4-AP2/SP1-miR182-LRRC4和LRRC4-miR185-DNMT1-LRRC4这两个调控环路存在的科学假说，阐明以LRRC4为节点的转录因子-miRNA-基因-甲基化修饰调控网络在脑胶质瘤细胞中的作用机制，从而为阐明胶质瘤的发生发展机制提供理论和实验依据。

LRRC4是我室自主克隆的脑胶质瘤抑瘤基因，可通过多条信号转导通路和表观遗传学修饰参与脑胶质瘤细胞生物学功能的调控。本课题在前期工作的基础上提出 “LRRC4-AP2/SP1-miR182-LRRC4和LRRC4-miR185-DNMT1-LRRC4这两个调控环路参与胶质瘤发生发展的科学假说。通过本课题研究，证实了miR-182或miR-381是胶质瘤治疗的潜在生物靶点，干扰miR-182或miR-381可通过调控靶基因LRRC4的表达，抑制BRD7的转录而抑制胶质瘤细胞的生长。其中，LRRC4-AP-2-miR-182-LRRC4调控环路在胶质瘤的发生发展中发挥了重要的作用；miR-185通过抑制靶基因DNMT1调控全基因组甲基化水平，恢复LRRC4等高甲基化基因在胶质瘤细胞中的表达，并通过抑制靶基因CDC42和RhoA的表达而发挥抑瘤基因的功能，其中LRRC4-miR-185/SP1-DNMT1-LRRC4调控环路在胶质瘤的发生发展中发挥了重要的作用。通过上述研究，构建了以LRRC4为核心的多相调控环路，即LRRC4-AP- 2-miR-182-LRRC4、LRRC4-miR-185-DNMT1-LRRC4及LRRC4-SP1- DNMT1-LRRC4，这些调控环路在胶质瘤中形成了多个正性反馈的调节过程，参与胶质瘤的发生发展。.本课题共发表SCI收录论文10篇，均标注受本课题资助；申请国家发明专利3项，授权国家发明专利2项；获湖南省自然科学二等奖1项，主编专著《非编码RNA与肿瘤》1部，，特邀大会报告3次。由于LRRC4是我室自主克隆的脑胶质瘤抑瘤基因，对其功能及作用机制的研究均属于国际领先水平，所获得的成果均拥有完全的自主知识产权。