药物耐受以及诱导/封闭MDR-1基因对膀胱癌侵袭转移能力影响的实验研究

膀胱癌是我国泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，但治疗后5年复发率仍高达50%-70%。多药耐药的产生被认为是引起膀胱癌复发的重要原因。而在浅表性膀胱癌中经手术和药物治疗后约有10%-25%经一次或多次复发后，其恶性度逐渐增高，最终发展成浸润性膀胱癌，此时膀胱肿瘤对化疗药物敏感性迅速降低的同时，伴有侵袭表型的改变。上皮细胞间质转换(Epithelial Mesenchymal Transition，EMT)被认为是肿瘤获得高侵袭转移潜能的关键启动步骤。那么化疗药物在杀伤膀胱癌细胞的同时会不会也影响到其侵袭能力呢？此外，是不是由于耐受了化疗药物的杀伤作用而存活下来的膀胱肿瘤细胞自身属性及生物学行为发生变化，通过发生EMT转变，获得高复发及高侵袭潜能呢？本课题拟利用分子生物学技术和手段，在体外体内水平研究药物耐受以及与药物耐受密切相关的MDR-1基因对膀胱癌侵袭转移能力的影响。

在我国,膀胱肿瘤是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，且发病率呈不断增高趋势。临床上约70%左右的初发膀胱肿瘤为浅表性肿瘤，但经手术（以经尿道肿瘤电切为主）和药物治疗后5年复发率仍高达50%～70%。大量证据表明包括膀胱肿瘤在内的多数肿瘤化疗失败很大程度上是由于多药耐药（multidrug resistance，MDR）的产生。.在膀胱肿瘤中，MDR-1基因及其编码的P-gp糖蛋白的过度表达被认为是膀胱肿瘤MDR产生的最重要机制。研究表明，膀胱肿瘤组织尤其是复发性膀胱肿瘤存在有高水平的MDR-1基因mRNA及其蛋白（P-gp）表达；此外，高级别膀胱肿瘤组织中,P-gp的阳性表达也显著较低级别者升高。这提示可能在初次治疗后的膀胱肿瘤由于某种机制的存在而导致MDR-1基因表达升高，最终通过某种机制促进了膀胱肿瘤的进展。在临床上我们还观察到，在浅表性膀胱肿瘤中在手术和药物治疗后约有10%～25%经一次或多次复发后，其生物学行为改变，恶性度逐渐增高，最终发展成浸润性膀胱肿瘤，此时肿瘤对化疗药物敏感性迅速降低的同时，伴有肿瘤侵袭表型的改变，即出现了膀胱壁肌层组织的浸润以及对邻近和远处器官的转移。.以顺铂为基础的化疗方案在膀胱肿瘤化疗中起了重要作用，疗效显著，然而，基于此方案的耐药也最为广泛，且发生耐药后，肿瘤进展急剧加速，具体机制仍不清楚。在前期研究过程中，我们发现，NF-kappa B信号通路的活性与膀胱肿瘤级别正相关，且此信号通路在膀胱肿瘤EMT过程中以及干细胞特性维持中有很重要的意义。EMT标记物，诸如E-Cad、Slug、Snail、Twist等的启动子结合区均有该信号通路的结合位点，即该通路靶向EMT标记物表达。相关研究也证实，顺铂在抑制肿瘤细胞增殖过程中，可能会产生氧自由基，后者通过激活蛋白酶进一步促进IKappa B降解，最终导致NF-Kappa B通路激活。.基于此，我们提出设想：在以顺铂为主的化疗药物的刺激下，化疗耐药的膀胱肿瘤细胞发生了自身属性及生物学功能行为的变化，导致其侵袭迁移能力进一步增强，这一些列的结果可能与NF-Kappa B信号通路激活有关，且这种作用可能与NF-kappa B靶向MDR-1表达有关。