本课题应用基因转染技术建立外源性(CA)14简单重复序列的肿瘤细胞转染克隆。外源(CA)14序列发生碱基的插入与丢失突变,使转法克隆内质粒标记基因lacZ恢复正常表达。以X-gal染色细胞变蓝加以判断,直接反映肿瘤细胞DNA分子复杂的突变状态和不稳定性。本研究共获得RER+细胞株RKO稳定转染克隆23个,HCT116转染克隆24个。其中13/23RKO克隆,8/24HCT116克隆出现蓝细胞。而RER-细胞株Sw480的11个转染克隆无一有蓝细胞。说明外源性(CA)14序列与细胞内源性微卫星序列一样,在RER+细胞内是不稳定的。并且这种易于突变的特性在细胞传代过程中的持续保持,其蓝细胞的发生率为0.1~0.2%。我们以RKO转染克隆为靶细胞,研究了大蒜素,亚硒酸钠,人参浸泡液等十余种已认为有抗癌防癌作用的药品和化合物对肿瘤细胞微卫星不稳定性(micro sate llite instability MIN)的影响。其中大蒜素,亚硒酸钠、维甲酸,茶多酚能抑制肿瘤细胞MIN,蓝细胞阳性率下降50%以上。小剂量亚硒酸钠长期作用也能抑制瘤细胞的MIN。人参浸泡液等其他中药对MIN无影响,提示它们的防癌抑癌作用与肿瘤细胞的MIN无直接关系。
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数据更新时间:2023-05-31
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