基于磁性表面分子印迹核壳微球的针毛蕨属植物中抗肿瘤活性成分分离及筛选研究

中国蕨类植物资源十分丰富。前期研究证实针毛蕨属的多种植物中富含结构新颖的色原酮环己烯酮类抗肿瘤活性成分，该类化合物结构较复杂且含量低，分离提纯难度大。本项目以针毛蕨属植物中抗肿瘤活性显著的两种新化合物为模板分子，以自制Fe3O4/SiO2纳米微球为"种子"，采用种子乳液聚合法制备出磁响应强、"类特异性"强、高吸附容量、性能稳定和具有水相识别功能的磁性表面分子印迹核壳微球。该微球在外加磁场的驱动力下，直接从药材粗提液中"靶向富集"出活性成分；与LC-MS联用，实现对活性成分的分离和鉴定一体化；结合柱色谱分离技术，快速分离纯化出单一活性成分，利用生化分析手段研究单一活性成分对肿瘤细胞的抑制作用，建立针毛蕨属植物中抗肿瘤活性成分分子印迹识别-磁分离-抗肿瘤活性评价联用新技术。本研究将为加速新的活性成分/先导化合物的发现提供重要的方法支撑，为中药现代化研究提供新思路，为抗肿瘤新药研制奠定基础。

中国蕨类植物资源十分丰富。前期研究证实针毛蕨属的多种植物中富含结构新颖的B环为非芳香环的色原酮环己烯酮类抗肿瘤活性成分，该类化合物结构较复杂且含量低，分离提纯难度大。为了克服传统提取分离方法的非特异性和低效性，高效、系统地从针毛蕨属植物中筛选出抗肿瘤活性成分或先导化合物，解决目前从植物资源中难以快速、高效筛选抗肿瘤活性成分的难题，本课题利用纳米技术和分子组装设计，采用替代模板分子印迹思路，以与具有显著抗肿瘤活性的新型色原酮环己烯酮类新化合物PA和DEDC结构极为相似的化合物KMF为模板分子，研究基于纳米磁性粒子母核的最佳表面分子印迹方法与条件；制备得到磁响应强、“类特异性”强，吸附容量大、性能稳定和具有较好水相识别功能的磁性表面分子印迹核壳微球；采用X射线衍射仪（XRD）、扫描电子显微镜（SEM）、傅立叶变换红外光谱仪（FT-IR）和热重分析仪（TGA）等仪器对合成的颗粒物进行了表征；在吸附性能和分子识别性能研究的基础了探讨了材料的识别机理。优化其从复杂粗提液中分离/富集痕量活性成分的参数，考察其再生能力，建立高效、高选择性的活性成分分离/富集方法；与LC-MS联用，利用质谱测定技术的高灵敏度和独有的混合解析能力，发现新的潜在活性成分或先导化合物；结合柱色谱分离技术，快速分离纯化出可能的单一活性成分，采用体外抗肿瘤实验研究单一活性成分对肿瘤细胞的抑制作用，建立针毛蕨属植物中抗肿瘤活性成分分子印迹识别–磁分离–抗肿瘤活性评价联用新技术。研究完成了对普通针毛蕨、翠绿针毛蕨、针毛蕨等植物中潜在活性化合物的筛选工作。本研究将为加速新的活性成分/先导化合物的发现提供重要的方法支撑，为中药现代化研究提供新思路，为抗肿瘤新药研制奠定基础。