FK1706对外周神经端侧吻合大鼠神经再生的作用及机制研究

The most frequent form of neural tube defect is Spinal bifida and myelomeningocele. At present neurogenic bladder dysfunction due to sacral nerve which innervates bladder voiding abnormalities is lack of effective treatment leading to renal failure and death. FK1706 is a kind of non-immnunosuppressive immunophilin derivatives from tacrolimus(FK506)which can protect nerve and promote nerve regeneration well. FK1706 is a novel pro-nerve regeneration factor which has been discovered in the recent years.It has been established that end-to-side neurorrhaphy of autonomic nerve and somatic nerve can promote nerve regeneration and bladder functional recovery. The FK1706 will be applied in the rat model of end-to-side neurorrhaphy of autonomic nerve and somatic nerve in peripheral nervous system to improve the effect of nerve regeneration and bladder function rehabilitation and explore the action mechanism,providing stable experimental evidence for neurogenic bladder dysfunction treatment by neural repair pathway in clinical.

脊柱裂脊髓脊膜膨出是最常见的神经管缺陷，由于支配膀胱排尿的骶神经发育异常导致的膀胱功能障碍目前缺乏有效的治疗方法，最终引起患者肾功能衰竭危及生命。FK1706是免疫抑制剂他克莫司（FK506）的非免疫抑制衍生物，具有良好的神经保护和促进神经再生作用，且无免疫抑制，是近几年研究发现的一种新型促神经再生因子。内脏神经和躯体神经端侧吻合已被证明可以促进内脏神经再生和膀胱功能恢复。本课题拟通过在外周内脏神经—躯体神经端侧吻合大鼠模型中应用FK1706，进一步提高神经再生效率和膀胱功能的修复效果，并探讨FK1706促进神经再生的作用机制，为临床通过神经修复途径治疗神经源性膀胱功能障碍提供可靠的实验依据。

神经源性膀胱缺乏有效的治疗方法，严重影响患者的生活质量，是患者死亡的主要原因。内脏神经-体神经端侧吻合可以促进内脏神经再生，修复膀胱功能。FK1706是免疫抑制剂他克莫司的衍生物，具有保护神经和促进神经再生的特点，无免疫抑制。FK1706能否促进内脏神经再生和膀胱功能的修复，国内外未见报道。FK1706组：L5水平横断建立脊髓损伤大鼠模型，将支配膀胱的内脏神经（L6）与体神经（L4）进行端侧吻合，术后应用FK1706。单纯吻合组：模型同FK1706组，给予生理盐水。对照组：显露双侧L4-S1脊神经，离断双侧L6-S1前后根，保持左侧L6前根完整。术后4个月，通过神经形态学观察神经再生效果。分子生物学检测神经再生蛋白S100β、GAP43和βIII tubulin和基因的表达。通过BL-420实验系统，检测膀胱功能的恢复，记录大鼠膀胱逼尿肌最大收缩压力（MDP）和残余尿量（RUV）。.逆行神经示踪在FK1706组和吻合组L4均可见荧光金单标、荧光金-快蓝双标神经元。电镜观察FK1706组和吻合组内脏神经髓鞘厚度分别为0.6724 ± 0.1101μm和0.4668 ± 0.0763μm。FK1706组和吻合组盆副交感神经有髓轴突数量分别为535.7 ± 45.2和337.4 ± 56.5，两组之间具有明显差异（P < 0.01）。FK1706组蛋白表达分别为1.546 ± 0.046，1.046 ± 0.075和2.161 ± 0.109，吻合组蛋白表达分别为0.810 ± 0.043，0.731 ±0.027和1.073 ± 0.118，两组具有明显差异（P < 0.01）。FK1706组基因表达分别为2.128 ± 0.043，2.153 ± 0.117和2.314 ± 0.056，吻合组基因表达分别为1.792 ± 0.030，1.524 ± 0.041和1.929 ± 0.03，两组有显著差异（P < 0.01）。FK1706组MDP和RUV分别为44.6 ± 6.7 mmHg和1.16 ± 0.24 ml，吻合组MDP和RUV分别为32.5 ± 5.4 mmHg和2.36 ± 0.34 ml，两组之间具有明显差异（P < 0.01）。.FK1706可以明显提高内脏神经-体神经端侧吻合后内脏神经再生数量，改善膀胱功能恢复效果，为治疗神经源性膀胱带来希望。