乳腺癌间质纤维母细胞对紫杉醇化疗疗效的影响及其机制探讨

化学治疗是乳腺癌综合治疗的重要手段之一，临床观察发现同一类型,分期相同的乳腺癌病人其化疗疗效存在明显差异，其机制尚不完全清楚。既往有关化疗疗效的研究主要集中于肿瘤细胞本身，然而,近年研究表明，肿瘤间质在肿瘤的生长、浸润及转移的过程中起重要作用，作为肿瘤间质主要成分的乳腺癌间质纤维母细胞（CAF）既可分泌细胞因子如基质细胞衍生因子-1(SDF-1），也可产生胶原，共同影响肿瘤的生物学特性。因此，探讨乳腺癌间质纤维母细胞在紫杉醇化疗中的作用有重要的临床意义。本研究从乳腺癌病人癌组织中分离并培养CAF，然后通过细胞学和肿瘤种植动物实验，研究乳腺癌间质纤维母细胞及其趋化因子SDF-1和胶原的变化对紫杉醇化疗疗效的影响。另外，结合临床新辅助化疗，检测化疗前后乳腺癌病人癌组织中CAF量、SDF-1表达的变化与化疗疗效的关系，探索提高乳腺癌化疗疗效的新途径。

乳腺癌间质成纤维细胞（CAFs）是肿瘤微环境的重要组成成分，可对乳腺癌化疗作用产生重要影响；但相关作用机制尚不清楚。本研究采用双酶消化法成功从乳腺癌病人癌组织标本中分离、培养出间质成纤维细胞，将其（CAFs，第3-4代细胞）与乳腺癌细胞系MDA-MB231共培养，然后加入多西他赛，结果观察到CAFs可明显增加乳腺癌细胞增殖、浸润及粘附性，并影响化疗的效果。使用表达谱芯片进一步探索CAFs影响化疗效果时发现：CAFs与MDA-MB-231共培养体系在多西他赛作用下CAFs出现17个上调表达基因及18个下调表达基因。根据芯片结果，选取变化最为显著的WNT-16B作为研究重点，采用RT-PCR, Westernblot进行验证；实验结果表明经化疗药处理后CAFs其WNT-16B在转录与翻译水平表达量明显升高，并可通过NF-KB及β-catenin信号通路阻碍多西他赛的化疗效果。裸鼠动物实验也显示CAFs可阻碍多西他赛化疗疗效，促进肿瘤生长。此外，病理检测发现乳腺癌病人新辅助化疗后癌组织中胶原蛋白含量明显升高，且这种改变与化疗疗效有关，p<0.01。本研究表明：CAFs可通过分泌WNT-16B、胶原途径阻碍多西他赛在乳腺癌化疗中的疗效，这为临床提高乳腺癌化疗疗效提供了新的思路和方向。