脂肪源性神经干细胞脑脊液移植治疗多发性硬化模型鼠及其机制研究

多发性硬化（MS）为严重致残性中枢神经系统自身免疫性脱髓鞘疾病，临床上治疗棘手。神经干细胞（NSC）脑脊液移植治疗MS小鼠可获理想效果，但局限于NSC来源不足及易引起免疫排斥反应。我们前期研究表明，脂肪干细胞（ADSC）能转化为NSC样细胞（即脂肪源性NSC，aNSC）,aNSC能克服NSC的缺点。另外，aNSC和NSC各项性质非常接近，这提示aNSC治疗MS小鼠可能有效。本课题拟体外转化小鼠ADSC为aNSC。aNSC脑脊液移植治疗MS小鼠，从行为学和病理学两方面评价aNSC对MS小鼠的治疗作用。运用LacZ标记，电镜及荧光定量RT-PCR等技术，研究aNSC在脱髓鞘部位的分化能力及形成新髓鞘能力；aNSC对脱髓鞘部位星型胶质细胞和少突胶质细胞祖细胞的影响；aNSC分化前后的细胞因子分泌功能；以及aNSC对脱髓鞘部位细胞因子水平的影响。为临床自体aNSC脑脊液移植治疗MS提供重要依据。

本研究采用免疫细胞化学、流式细胞技术、电镜、免疫组化、细胞标记示踪、LFP染色技术及功能评分等手段对小鼠脂肪源性神经干细胞在体外的分化能力进行详细研究，进一步对脂肪源性神经干细胞脑脊液移植治疗EAE小鼠及其机制进行了系统性研究，得出以下结论：1）体外可分离和纯化小鼠脂肪干细胞，我们通过流式细胞技术及免疫荧光技术等对脂肪干细胞进行了鉴定；2）小鼠脂肪干细胞可诱导分化为神经干细胞样细胞，神经干细胞样细胞在形态学、表面标志物及分化功能方面均与真正神经干细胞极为相似；3）小鼠脂肪源性神经干细胞可分化为雪旺细胞样细胞；4）小鼠脂肪源性神经干细胞脑脊液移植可有效减轻EAE小鼠神经功能评分；5）脂肪源性神经干细胞减轻EAE小鼠神经功能评分的机制包括减少炎性细胞浸润、减少脱髓鞘病灶数目、干细胞向炎性部位迁移及聚集、干细胞移植诱导体内细胞增殖及诱导少突胶质细胞增生以及移植的干细胞可能在体内分化为雪旺细胞样细胞等；6）我们的体外实验还发现骨髓间质干细胞（与脂肪干细胞极为相似）来源神经干细胞能分化为雪旺细胞祖细胞及功能性雪旺细胞样细胞。