SHP-2负向调控巨噬细胞TLR-4信号干预梗阻性肾病肾纤维化的作用机制研究

巨噬细胞及其TLR-4信号在梗阻性肾病肾纤维化中发挥重要的启动作用。SHP-2是巨噬细胞TLR-4信号重要的负向调控分子。对巨噬细胞中TLR-4信号的调控研究，有助于探索梗阻性肾病所致肾纤维化的发病机制和探寻抑制肾纤维化的干预靶点。我们在前期工作中采用Cre-loxp系统，成功繁育出巨噬细胞SHP-2基因条件性缺陷的小鼠，并建立了能够模拟临床梗阻性肾病所致肾纤维化发病过程的UUO动物模型。在此基础上，本课题拟研究SHP-2表达与敲除对梗阻性肾病中巨噬细胞TLR-4信号活化与抑制的作用机制，探讨巨噬细胞SHP-2条件性缺失以及高表达对梗阻性肾病所致肾纤维化的影响，发现干预肾纤维化进程的关键靶点，为梗阻性肾病所致肾纤维化的临床治疗提供实验依据。

梗阻性肾病（Obstructive nephropathy）是泌尿外科的常见病多发病，由其所导致的肾纤维化和肾实质萎缩危害甚大，往往会破坏肾脏的功能，甚至发展为肾功能衰竭。缺血性氧化损伤在慢性肾纤维化中的作用尤为显著。先天免疫系统在缺血性氧化损伤的发生发展过程中发挥着重要的作用，主要有三种发病模式，包括肾小球纤维化、肾小管性纤维化及上皮-间质细胞转化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）。在肾小球纤维化和EMT模式中，通过Toll样受体（Toll like receptors，TLRs）活化巨噬细胞的作用尤为突出。而近年来，研究发现SHP2参与巨噬细胞炎性免疫应答过程，但具体机制尚有争议，同时在肾缺血性氧化损伤的作用尚无人报道。本课题组采用Cre-loxp系统，成功繁育出巨噬细胞SHP-2基因条件性缺陷小鼠，并利用该模式小鼠成功构建单侧输尿管梗阻（Unilateral Ureteral Obstruction，UUO）模型，与正常小鼠相比，巨噬细胞SHP-2基因条件敲除小鼠肾脏巨噬细胞浸润减少，同时检测相关细胞因子表达和分泌情况发现，TNF-α、TGF-β、IL-1β、IL-6表达下调。说明SHP-2在体内正向调节巨噬细胞发挥促进炎症反应的作用。这虽与项目预期结果相反，但仍有重要的现实意义，为研究自然免疫参与肾纤维化过程中巨噬细胞的作用提供了新的思路，同时抑制SHP-2表达也为肾纤维化的治疗提供新的方法。在本项目资助下本研究小组完成SCI收录论文12篇，并培养硕士和博士研究生8人。