OPG/RANK/RANKL在骨巨细胞瘤中作用及MicroRNA-210对其调控的实验研究

Giant cell tumors of bone (GCTB) is one of the most common primary bone tumors, its pathogenesis is unclear,locally aggressive and recurrence rate is high is one of the problem in clinical . The research on Micro - RNA in GCTB is still rarely, our previous studies have shown that the mirna - 210, hif - 1 alpha expressing anomalies associated with GCTB exists, but the exact regulatory mechanism is unknown. Based on this, puts forward the following false: OPG/RANK/RANKL plays an important role in developing GCTB ODF, RANK and high protein and mRNA expression of RANKL and OPG protein and lower expression of mRNA, promoted the development of the GCTB, and mirna - 210 can through regulating OPG/RANK/RANKL signaling pathways, to effectively restrain GCTB formation. By gene transfection, rt-pcr, Western blot experimental techniques such as detection of OPG/RANK/RANKL signaling pathways related factor expression. Believe in giant cell tumor of micrornas can study as we learn more about the giant cell tumor occurrence and development mechanism, and provide new targets for the clinical diagnosis and treatment.

骨巨细胞瘤（GCTB）是临床常见的原发骨组织肿瘤之一，发病机制尚不明确，其侵袭性及复发率高是治疗该疾病的难题之一。目前关于GCTB中Micro -RNA的研究仍很少，我们的前期研究结果表明MicroRNA-210、低氧诱导因子-1α表达异常与GCTB存在关联，但确切调控机制不明。基于此，提出如下假：OPG/RANK/ RANKL在GCTB的发生发展中具有重要作用，ODF、RANK与RANKL的蛋白及mRNA的高表达，OPG的蛋白及mRNA的低表达，促进了GCTB的发生发展，而MicroRNA-210可以通过调控OPG/RANK/ RANKL信号通路，对GCTB形成进行有效抑制。通过基因转染、RT-PCR、Western blot等实验技术检测OPG/RANK/ RANKL信号通路相关因子表达。研究骨miRNA在GCTB发生与发展机制中作用，并为其临床诊断和治疗提供新的靶点。

背景：骨巨细胞瘤（GCTB）是常见的原发性骨肿瘤之一，但其发病机制尚不明确，与此同时较高复发率高也使该疾病成为了棘手的难题。.研究内容：本项目通过建立动物模型及体外培养骨巨细胞瘤细胞的方法进行实验研究，探讨OPG/RANK/RANKL 在 GCTB 的发生发展中的作用，及其与细胞自噬之间的调控关系，并分析miR-217表达变化与骨巨细胞瘤增殖、纤维化、自噬之间的关系。.结果：（1）OPG，RANK和RANKL高表达于hFOB细胞中；（2）miR-217 高表达，GCTB细胞数量会减少，细胞生存率降低，抑制细胞增殖；（3）miR-217高表达，可抑制GCTB细胞的迁移和侵袭；（4）miRNA-217 mimic 组细胞中 LC3、Atg5、Atg7、 Beclin1 的 mRNA 表达显著低于 NC 组，差异有统计学意义；（5）透射电镜检测发现 miRNA-217 抑制hFOB细胞自噬小体形成，miRNA-217 表达下调时，促进细胞自噬。.科学意义：（1）MicroRNA，细胞自噬与GCTB的发生发展存在关联;（2）在GCTB的发生过程中，OPG的蛋白及mRNA高表达，RANK与 RANKL的蛋白及mRNA低表达;（3）在GCTB的发生过程中，miRNA-217 通过调控OPG/RANK/RANKL信号通路的相关因子、蛋白及mRNA，从而抑制GCTB增殖，迁移和侵袭，进而可能防止肿瘤的复发。（4）过表达 miRNA-217 的人GCT0404细胞中自噬基因相关mRNA及蛋白表达显著下调，miRNA-217抑制人GCT0404 细胞中自噬小体形成，过表达 miRNA-217 能够抑制 GCT0404 细胞自噬。