穿孔素和颗粒酶基因对肝移植急性排斥早期诊断的研究

第一阶段，应用简化三袖套法建立了金黄地鼠至大鼠原位肝移植急性排斥反应的稳定模型，该模型肝组织内有大量单个核细胞浸润、广泛的肝细胞坏死和出血。第二阶段，免疫组化示移植肝内有大量OX8阳性细胞浸润，并有穿孔素和Fas配体表达细胞，说明CTL参与其排斥。第三阶段应用逆转录聚合酶反应检测发现术后3天即有穿孔素、颗粒酶B和Fas配体表达，4天后表达明显增强，并贯穿整个排斥反应的全过程，其开始表达时间比组织学排斥改变早两天，具有早期诊断价值。第四阶段应用环孢素A和脾切除治疗显著延长排斥组受体动物生存时间，移植后两周内均不表达穿孔素、颗粒酶B和Fas配体。说明该三基因同时具有判断免疫抑制疗效的价值。