Myosin X调控外泌体信号参与结直肠癌侵袭、转移的分子机制

Distant metastasis is responsible to the death and treatment failure in patients with CRC. Exploring the mechanisms underlying CRC metastasis and finding the key target molecules has great implications for the the prevention and treatment of colorectal cancer metastasis.. In our previous study, we found Myosin X, an unconventional myosin locating at the tip of filopodia, played an important role in sRGMc-mediated liver metastasis of CRC by promoting the growth of filopodia and regulating the phosphorylated focal adhesion kinase (FAK). Live image and immuno-precipitaion assay suggest exsomes, a kind of membrane vesicles secreted by tumor cell, regulated tumor microenviro- ment and promoted CRC metastasis. Myosin X may functions in the trafficking pathway of exsomes.. Based on our previous study, the role of Myosin X in the trafficking of exsomes will be explored further by gel chromatography, two-dimensional difference gel electr ophoresis, and other techniques. Established stable cell line knocked down Myosin X and an animal model with liver metastasis of CRC will be used to detect the role and molecular mechanisms underlying exosome signaling regulated by Myosin X in the invasion and metastasis of colorectal cancer. The findings of this project will enrich the theory of malignant tumor metastasis and provide a novel way for the the prevention and treatment of colorectal cancer metastasis..

结直肠癌(CRC)远处转移是导致患者死亡和治疗失败的主要原因。研究CRC转移机制，发现调控CRC转移的关键靶分子，对预防和治疗结直肠癌转移有重要意义。. 我们在前期的研究中发现，Myosin X，一个位于丝状伪足尖端的非传统型肌球蛋白，通过促进丝状伪足生长、调节磷酸化粘着斑激酶表达等机制参与分泌型RGMc诱导的CRC肝转移。活细胞成像、免疫沉淀研究进一步发现，外泌体，一种由细胞分泌的囊泡状结构可能通过调控肿瘤微环境参与了Myosin X介导的CRC侵袭与转移。. 本项目在前期研究的基础上，通过凝胶层析、差异蛋白组学等深入探讨Myosin X对外泌体的调控作用。利用已成功建立的稳定细胞系和CRC肝转移模型，体内、外验证Myosin X调控的外泌体信号在结直肠癌侵袭、转移中的关键作用，并探索分子机制。这将为有效预防和治疗结直肠癌肝转移提供新的思维方向和理论依据。

结直肠癌(CRC)远处转移是导致患者死亡和治疗失败的主要原因。研究CRC转移机制，发现调控CRC转移的关键靶分子，对预防和治疗结直肠癌转移有重要意义。Myosin X，一个位于丝状伪足尖端的非传统型肌球蛋白，通过促进丝状伪足生长、调节磷酸化粘着斑激酶表达等机制参与分泌型RGMc诱导的CRC肝转移。活细胞成像、免疫沉淀研究进一步发现，外泌体，一种由细胞分泌的囊泡状结构可能参与了Myosin X介导的CRC侵袭与转移。Myosin X调控外泌体的产生吗？其机制及生物学意义是什么？迄今尚不清楚。在本课题中，我们探讨了Myosin X表达与结直肠癌患者的预后关系；利用已成功建立的Myosin X敲减稳定细胞系，通过对其培养上清进行序贯超速离心，获取外泌体。并对获取物质进行电镜验证、及凝胶层析和差异蛋白组学的分析；另通过细胞学和动物实验研究Myosin X对细胞外泌体产生和生物学功能的影响，探讨MyosinX调控的外泌体信号在结直肠癌侵袭、转移中的关键作用。我们的研究发现组织标本中Myosin X相对低表达组预后明显好于高表达组；Myosin X敲减后外泌体成分和大小将发生变化，Myosin X可能通过对外泌体包含物成分和大小的调节间接调控外泌体的生物学功能。高侵袭潜能的结直肠癌细胞分泌的外泌体可通过上皮间质转化、促侵袭等机制调控低侵袭潜能结直肠癌细胞的侵袭能力、并通过增加癌细胞的抗凋亡能力抵抗化疗药物。另结直肠癌细胞分泌的外泌体可使肿瘤间质细胞（肿瘤相关的成纤维细胞、血管内皮细胞等）的生物学功能发生变化。以上结果提示结直肠癌细胞通过外泌体与不同亚群的癌细胞及肿瘤间质细胞进行相互作用，共同构建赖以生存的肿瘤微环境。减弱Myosin X，这种促肿瘤生长的微环境将被破坏，从而达到治疗肿瘤的目的。这将为有效预防和治疗结直肠癌肝转移提供新的思维方向和理论依据。