Myosin X/Neogenin在结直肠癌定向肝转移中的作用及治疗学意义

结直肠癌(CRC)肝转移临床极为常见，也是导致患者死亡和治疗失败的主要原因。研究CRC定向肝转移机制，发现调控CRC肝转移的关键靶分子，对预防和治疗结直肠癌肝转移有重要意义。.丝状伪足在恶性肿瘤转移的起始阶段、中间阶段，及远处靶器官定居的终末阶段均发挥关键作用。Myosin X是我们在前期研究中发现的一种促进丝状伪足生长的重要蛋白，能与肝细胞产生的分泌型RGMc的受体Neogenin直接结合,且Myosin X、Neogenin都高表达于侵袭潜能强的结肠癌细胞系。鉴于RGMc可诱导肿瘤细胞定向迁移及它在肝脏的特殊表达部位，我们推测Myosin X/Neogenin信号参与了CRC定向肝转移。.本项目在前期研究的基础上，通过建立稳定细胞系和动物模型验证Myosin X/Neogenin在结直肠癌的定向肝转移中的作用，这将为有效预防和治疗结直肠癌肝转移提供新的思维方向和理论依据。

结直肠癌(CRC)肝转移临床极为常见，也是导致患者死亡和治疗失败的主要原因。研究CRC定向肝转移机制，发现调控CRC肝转移的关键靶分子，对预防和治疗结直肠癌肝转移有重要意义。丝状伪足在恶性肿瘤转移的起始阶段、中间阶段，及远处靶器官定居的终末段均发挥关键作用。Myosin X作为促进丝状伪足生长的重要蛋白，能与肝细胞产生的分泌型RGMc的受体Neogenin直接结合，且Myosin X、Neogenin都高表达于侵袭潜能强的结直肠癌细胞系。Myosin X/Neogenin信号是否是CRC定向肝转移是的关键步骤之一？是一个值得探讨的课题。我们针对这一关键问题作了深入研究。首先，我们在体外实验中采用蛋白印记及免疫组化技术检测了Myosin X 在结直肠癌细胞系和CRC临床标本中的表达。结果显示，Myosin X在侵袭性较高的LSLiM6，T84，SW620，LS174T大肠癌细胞系中高表达、且在结直肠癌临床组织标本中的表达与区域淋巴结转移有一定相关性；利用已构建成功的特异性敲除Myosin X的miRNA质粒，我们进一步建立了稳定敲除Myosin X的结肠癌细胞系对Myosin X的功能进行了研究。并通过实时动态划痕实验、Tanswell小室比较了Myosin X敲除对肿瘤细胞运动和侵袭能力的影响。在对可溶性RGMc对结肠癌细胞的趋化作用研究中，我们制备了分泌型RGMc。通过Dunn Chamber实验证实了Myosin X在sRGMc诱导的结肠癌细胞趋化运动中的重要作用；以及Myosin X通过调节细胞表面ErbB2、MMP2、Calpain蛋白的分布和磷酸化的粘附斑激酶水平来介导结肠癌细胞定向肝转移的可能机制。继而在体内实验中，通过建立的结肠癌肝转移模型，并利用在体生物学发光技术进一步验证了Myosin X为靶点的生物治疗可抑制结直肠癌的生长及转移。这为有效预防和治疗结直肠癌肝转移提供新的思维方向和理论依据。