植物G蛋白互作因子的筛选与鉴定及其信号转导途径的分子机制研究

植物异三聚体G蛋白（heterotrimeric G protein）在光、疾病防御及激素应答等重要信号转导途径中起重要作用。然而，我们对它所起作用的分子机理了解却很少。在本项研究中，我们借助酵母反向Ras恢复系统（reverse Ras Recruitment system ，rRRS）来筛选、鉴定与拟南芥GPA1相互作用的蛋白因子，并用GST pull down分析方法和亲和层析方法体外鉴定GPA1与互作因子之间的相互作用，通过体内免疫共沉淀反应﹑生物化学分析与异位过量表达分析来进一步验证它们之间的相互作用。筛选GPA1互作因子的突变体以及与包括gpa1在内的其它信号蛋白突变基因构成的双突变体，通过鉴定突变体对已知G蛋白介导的信号转导事件（光、激素、病原菌处理）产生的效应与表型性状，揭示G蛋白信号转导途径的运转机理。