基因重组抗膀胱癌-丝裂霉素双特异性抗体片段的研究

以基因重组方法，由抗J82及MMC杂交瘤中分别提取mRNA，反转录为编码H链及L链可变区的cDNA，构建H链及L链可变区基因，分别扩增出抗膀胱癌及抗丝裂酶素H链及L链基因并用Linker分别将抗膀胱癌及抗丝裂霉素Vh及V1连接，得到单链抗体可变区基因ScFV并在E.Coli中高效表达出抗丝裂霉素及抗膀胱癌单链抗体，经检测单链抗体效价及特异性与单克隆抗体等同。再将SCFV由质粒中分别提取出来后用“helica”linker将抗丝裂霉素SCFV及抗膀胱癌SCFV连接起来，得到编码抗丝裂霉素及抗膀胱癌双特异性单链抗体可变区基因，并在COS细胞中表达，得到双特异性抗体。经检测具有双特异性活性，蛋白经纯化后经氨基酸分析符合抗体可变区序列。