人星形胶质细胞抑制HIV-1在单核－巨噬细胞内成熟的功能蛋白组学研究

HIV相关神经认知功能失调（HAND）影响40-70%的HIV感染者。我们的前期工作表明星形胶质细胞可抑制HIV-1在小胶质细胞以及单核-巨噬细胞（M/M）内的成熟，这提示大脑中可能存在抗HIV的生理性机制。本项目将分别利用人M/M单独培养、人星形胶质细胞与M/M共培养两个体外HIV-1 感染模型研究该机制。技术手段包括病毒学、细胞生物学、差异显示凝胶双向电泳、生物质谱学和生物信息学等，目标是找到人星形胶质细胞控制HIV-1在M/M内成熟的靶通路和靶蛋。本研究将利用激动和拮抗的干预手段在M/M单独培养模型中验证上述靶点的有效性，这也另可回答在没有星形胶质细胞存在的条件下，直接干预这些靶点可否达到控制HIV-1成熟的目的。本研究不但有利于进一步认识HAND，而且，将这种中枢神经系统可能存在的抗HIV-1机制进而用于针对HAND和外周感染的药物开发是一种理论上的创新，并具潜在应用前景。

HIV 相关神经认知功能失调（HAND）影响40-70%的HIV 感染者。本项目分别利用人单核巨噬细胞（M/M） 单独培养、人星形胶质细胞与M/M 共培养两个体外HIV-1 BaL感染模型研究该机制。我们发现与我们小鼠小胶质细胞研究结果相反，人星形胶质细胞具促进HIV-1在M/M中成熟的作用。我们进而利用基于iTRAQ的生物质谱技术对4种培养条件下的M/M总蛋白进行标记。经3次独立重复分别鉴定到4853、4516和4381个总蛋白。其中2961个蛋白在3次重复中均检出。对比在感染条件下的单核-巨噬细胞单独培养和共培养两组实验结果，筛选出显著下调蛋白88个，显著上调（1.2倍以上）蛋白57个。通路分析表明，这些差异蛋白反映HIV-1成熟与exosome途径密切相关。且HIV-1感染的巨噬细胞的Filamin C在星形胶质细胞共培养下上调43倍，可能是上述通路主要靶点，目前，我们正在应用假病毒系统确证该机制。病毒学方面，我们首次成功在人单核细胞中分离获得原代HIV-1病毒株，为HIV-1经单核细胞脑传播提供了直接证据。为了对抗HIV-1介导的中枢神经炎症，我们系统分析了S1P受体抑制剂的抗炎症机制。最后，我们成功开发了以翻译中mRNA定量化研究蛋白质的策略，为本研究的后续工作提供了更新更精密的技术平台。