灵芝对鹅膏毒肽所致肝损伤的保护作用及其机理研究

近年来我们对在我国南方省份发生的90余起蘑菇中毒事件调查表明，导致死亡的80%是由鹅膏菌属中的一些种类引起的。鹅膏菌中的致死毒素为鹅膏毒肽。目前国际上对鹅膏毒肽中毒治疗尚无特效药。我国一些医院在临床治疗上以灵芝菌解毒为主，采用中西药结合，取得了很好的疗效，但对解毒机理尚缺乏研究。本研究拟通过建立实验小鼠鹅膏毒肽中毒模型，测定灵芝煎剂处理后血清中肝功能指标（ALT、AST）、RNA聚合酶酶活性的变化以及肝组织病理变化，探讨灵芝的保护治疗作用；通过比较灵芝煎剂、水飞蓟素、维生素E等几种不同抗氧化活性的药物处理后肝功能酶活性与抗氧化活性（SOD、CAT、MDA）之间的关系来进一步探讨抗氧化活性与解毒之间的关系，从自由基和抗氧化活性方面来探讨灵芝解毒的机理。并进一步从灵芝子实体中提取具有抗氧化活性的化合物。为开发出具有良好解毒作用的药物打下基础。

大部分蘑菇中毒是由鹅膏菌属中的一些种类所引起，α-鹅膏毒肽是鹅膏菌中的最主要致死毒素，它能抑制RNA聚合酶Ⅱ进而阻止蛋白质的合成导致细胞死亡。目前国际上对鹅膏毒肽中毒治疗尚无特效药。我国一些医院在临床治疗上以灵芝菌解毒为主，采用中西药结合，取得了很好的疗效，但对解毒机理尚缺乏研究。（1）本研究建立了实验小鼠鹅膏毒肽（α-amanitin）中毒模型，确定了α-amanitin注射小鼠的剂量，分析了中毒后老鼠血清中丙氨酸转移酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）活性和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）以及丙二醛（MDA）含量的变化情况；鹅膏毒肽能显著降低小鼠血清中ALT、AST酶活性，导致肝功能受损，能显著降低肝组织中SOD、CAT酶活性和增加MDA含量，表明鹅膏毒肽通过破坏抗氧化系统，增加过氧化，破坏膜系统而导致细胞死亡。（2）通过测定鹅膏毒肽中毒组、药物处理组、对照组处理后小鼠血清中ALT、AST酶活性和肝组织病理切片分析、比较分析了灵芝煎剂、水飞蓟素、维生素C等几种药物对鹅膏中毒小鼠的治疗效果，表明灵芝对鹅膏毒肽所致肝损伤具有很好的治疗效果。（3）通过测定鹅膏毒肽中毒组、药物处理组、对照组处理后肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）以及丙二醛（MDA）含量的变化，从自由基和抗氧化活性方面探讨了灵芝解毒的机理，表明灵芝的抗氧化活性是其具有解毒作用的部分机理之一。（4）通过萃取、柱层析和高效液相色谱分离方法获得了灵芝提取液，并对其组分进行了药效分析，表明灵芝三萜对鹅膏毒肽所致肝损伤具有很好的保护效果。