调控葡萄糖转运蛋白GLUT4亚细胞定位的磷酸酶的筛选鉴定、作用机制及其功能研究

葡萄糖转运蛋白GLUT4在糖代谢平衡调控中发挥关键作用，与糖代谢异常为特征的胰岛素抵抗和2型糖尿病直接相关。GLUT4的亚细胞定位受胰岛素调控，胰岛素通过胰岛素受体介导的信号转导，引起GLUT4蛋白从胞内小泡重定位到细胞膜，从而促进葡萄糖的入胞。但是，胰岛素调控GLUT4细胞膜定位的信号通路并不完全清楚，特别是磷酸酶在此通路中的调控作用更缺乏系统的研究。本项目拟利用已有的针对细胞内数百个磷酸酶的有效shRNA库，用RNA干扰技术和稳定表达GLUT4的细胞株，系统化地筛选和鉴定未知的调控胰岛素信号转导和GLUT4转运的磷酸酶。在此基础上，利用腺病毒介导的过量表达和慢病毒介导的RNA干扰等技术，在体外培养的脂肪细胞体系中，对筛选获得的有作用的磷酸酶进行深入研究，希望重点阐明1-2个磷酸酶在调节GLUT4的亚细胞定位和胰岛素信号通路中的分子机制和功能，为研发新的治疗胰岛素抵抗的药物提供理论依据。