天名精抗甲流的活性成分及作用机制研究

In view of the global pandemic and variational situation of the influenza and based on the Chinese medicine theory of "heavy pestilence need to detoxify", we particularly select the herb of Carpesium abrotanoides which to treat the viral infectious diseases in clinical and the influenza A in folk to research. The previous research has screened the effective part (the total lactone) of Carpesium abrotanoides for treating the influenza A and separated 11 sesquiterpene lactones, in which there are 2 new compounds with novel structure. Meanwhile, some of compounds have better inhibitory to influenza A virus. On this basis, combined with literature report, we put forward a hypothesis “the sesquiterpene lactones of Carpesium abrotanoides →into the blood circulation →through inhibiting the influenza A virus, reducing the expression of hemagglutinin’ protein and mRNA, regulating the signal pathway which mediated by Toll like receptor (TLR4)→anti-influenza A”. Around this assumption, we shall carry on the separation of components in the effective part, and screen the activity of anti-influenza A virus. Meantime, we carry out the research of plasma-drug in vitro, to interpret the material basis of anti-influenza A virus. In addition, we shall research on inhibiting the influenza A virus, reducing the expression of hemagglutinin’ protein and mRNA, regulating the signal pathway of TLR4/MyD88/NF-кB to reveal the mechanism of anti-influenza A. The research will promote the development of its resources .

针对甲流全球流行和不断变异变型的状况，基于中医“疫重解毒”理论，特选择临床上常治疗病毒感染性疾病、且民间用于治疗流感的湖南省特色清热解毒药“天名精”进行研究，前期筛选出了抗甲流的有效部位（总倍半萜内酯），从中分离了11个倍半萜内酯，其中2个为结构非常新颖的新化合物，并且具有好的抗甲流病毒活性。在此基础上，结合文献报道，提出了一个假设“天名精中倍半萜内酯类成分→进入血液→通过抑制甲流病毒增殖、降低血凝素（HA）的mRNA及蛋白表达、调节Toll样受体（TLR4）介导的信号通路等途径→抗甲流”，围绕此假设，继续对有效部位进行系统成分分离和抗甲流活性筛选，并进行血药研究，从血药的角度来诠释抗甲流的物质基础；同时，从直接抑制甲流病毒增殖、降低血凝素的mRNA及蛋白表达、对肺组织TLR4/MyD88/NF-кB信号通路的影响等三个方面进行研究，揭示抗甲流的机制，促进天名精这一药用资源的开发利用。

针对甲流全球流行和不断变异变型的状况，基于中医“疫重解毒”理论，特选择临床上常 治疗病毒感染性疾病、且民间用于治疗流感的湖南省特色清热解毒药“天名精”进行研究。. 本项目从天名精药材的采集、鉴定和质量控制、天名精抗甲型H1N1流感的有效部位确定、天名精的提取、成分分离与结构鉴定、活性筛选、血药和作用机制7个方面进行了研究。. 结果：从天名精中分离鉴定65个化合物，其中10个为新化合物；筛选出了抗甲型H1N1、H3N2流感病毒的活性成分，并且从血药的角度诠释了天名精抗甲流的活性成分。同时，筛选出了部分抗肿瘤活性成分。. 作用机制的研究结果表明，中和病毒给药、预防感染给药和治疗感染给药3种方式下，天名精精制后的总内酯提取物均有明显的抗甲流病毒作用，并且对甲型流感病毒感染的MDCK细胞模型中TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IL-6的mRNA和TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达具有明显抑制作用，对病毒感染的细胞产生保护效果。提示：作用机制可能是通过抑制病毒诱导的TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的活化，抑制细胞膜表面的TLR4对病毒蛋白的识别，并通过下调NF-κB的活性，导致下游炎性细胞因子TNF-α、IL-6的表达下调，来发挥抗流感病毒的效果。. 本项目共发表论文8篇，其中SCI收录4篇；获得授权专利1项；培养了硕士研究生3名；获湖南省优秀硕士学位论文1项。. 通过本项目的研究，揭示了天名精抗甲流的物质基础和作用机制，验证了前期提出的假设，为开发抗甲流的新药提供了科学数据，为天名精资源的开发利用打下了基础。