目舒丸对睫状体平滑肌细胞内舒缩传导信号影响的实验研究

Clinical visual fatigue(asthenopia) incidence increased year by year, people get more and more attention of visual fatigue control . Clinical studies have confirmed, MUSHUWAN on accommodative asthenopia has a better therapeutic effect. However, the mechanism of action is unclear. This paper starts from molecular biology of the cell, cultured rabbit ciliary smooth muscle cells, using image analysis system for the detection of MUSHUWAN on rabbit ciliary smooth muscle contraction-relaxation effects; using confocal microscopy and RT-PCR technique for the detection of MUSHUWAN on rabbit ciliary smooth muscle intracellular contractile calcium dependent and non calcium dependent signal transfer factor ( PKC, RHOA ); using ELISA technique for the detection of MUSHUWAN on rabbit ciliary smooth muscle intracellular relaxatal signaling factor ( CAMP and NOS ) effect. Discussion on MUSHUWAN in the treatment of visual fatigue mechanism. This paper study the therapeutic mechanism of MUSHUWAN on asthenopia, and provide a new method for visual fatigue mechanism research.

临床上视疲劳的发病率逐年增多，关于视疲劳的防治越来越得到人们的关注。我院院内制剂目舒丸自1997年运用于临床来，临床研究发现其对调节性视疲劳有着较好的治疗作用。然而由于中医药治疗视疲劳的作用机制缺乏系统的实验研究，关于目舒丸的作用机制尚不清楚。人眼的调节功能依赖于睫状体平滑肌的收缩与舒张实现，本课题以此为切入点，从细胞分子生物学入手，培养人眼睫状体平滑肌细胞，检测目舒丸对人眼睫状体平滑肌细胞舒缩的影响；检测目舒丸对人眼睫状体平滑肌细胞内收缩的钙依赖及非钙依赖的信号传递因子（PKC、RHOA）及人眼睫状体平滑肌细胞内舒张的信号传导因子（CAMP及NOS）影响。探讨目舒丸治疗视疲劳的机制。为目舒丸在临床合理应用提供有力的依据，为中医药治疗视疲劳作用机制研究提供新方法。

视疲劳是目前眼科常见的一种疾病，是眼或全身器质性因素与精神(心理)因素相互交织的综合征，是一组表现为用眼后出现视觉障碍、眼部不适及全身症状以至不能正常进行视作业的症候群,因此,在临床上又常称为眼疲劳综合征。西医认为视疲劳的病因机制复杂多样,大体分为眼部因素、环境因素、全身因素，精神因素。其中由于眼部调节及集合异常而发生的视疲劳最为常见。由于调节和集合的异常，睫状肌和内直肌功能紊乱，导致神经支配的异常或肌肉的过度紧张发生视疲劳。视疲劳相当于中医“肝劳”，源于“肝开窍于目”“肝受血而能视”其主要核心病机是阴血不足、筋膜挛急。目舒丸针对调节性视疲劳的核心病机，可改善患者双眼调节幅度、正相对调节、相对调节幅度总量、眼加正镜片至模糊值、调节灵活性，从而改善患者视疲劳症状。为了探讨目舒丸对视疲劳患者调节功能影响的机制，我们实验研究从细胞分子生物学进行观察。研究发现，用药24h后0.5X，0.25X和0.125X三个目舒丸剂量组和用药48h后0.5X剂量组中cAMP含量均明显高于对应的对照组（p<0.05），而用药24h后目舒丸（2X和0.5X）组和用药48h后目舒丸（1X）组NOS含量明显高于对应的对照组（p<0.05）。实验发现在加入氯化乙酰胆碱24h前加入目舒丸，发生作用后，与单纯加入氯化乙酰胆碱组相比，睫状体平滑肌细胞内PKC及RhoA表达明显下降，差异具有显著意义（P<0.05）。故我们推测目舒丸目舒丸可能通过增加cAMP和NOS的含量，来发挥舒张睫状体平滑肌的作用；可通过降低睫状体平滑肌细胞内PKC及RhoA的表达，减少非钙依赖通道引起的睫状体平滑肌细胞收缩，进而改善睫状体平滑肌过度收缩引起的眼部调节功能异常。