TRIM44调控BCRA1诱导非小细胞肺癌顺铂耐药的研究

Cisplatin is the core of chemotherapy regimens for non-small cell lung cancer (NSCLC). But the effect is seriously limited by the occurrence of cisplatin resistance, of which the mechanism has not been elucidated. Supported by grants from the Certificate of China Postdoctoral Science Foundation Grant (2017M621307), we firstly find TRIM44 knockdown increased the sensitivity of NSCLC cells to cisplatin. But the mechanism has not been elucidated. In our study, microarray analysis suggested that TRIM44 influences the role of BRCA1 in DNA damage and repair in NSCLC cells. By proteomics approach, E2F1, a transcription factor of BRCA1 promoter, interacts with TRIM44. Immunoprecipitation assay confirmed this interaction. We hypothesized that TRIM44 interacts with E2F1 to promote cisplatin chemoresistance of NSCLC via BRCA1. Therefore, we are planning to study the function and mechanism of TRIM44 regulating NSCLC cisplatin resistance, by means of molecular biology technology including the single-cell gel electrophores, immunoprecipitation, xenograft models and patient cancer tissues. This study may provide a new perspective on the mechanism of cisplatin chemoresistance and a precise intervention target to increase sensitivity in clinical NSCLC chemotherapy.

顺铂是非小细胞肺癌(NSCLC)化疗的基石药物，顺铂耐药严重影响了NSCLC治疗效果，然而其机制尚不完全清楚。申请人在中国博士后科学基金(2017M621307)资助下，首次发现TRIM44下调可以增强NSCLC细胞对顺铂的敏感性，然而TRIM44通过何种机制发挥该功能国内外尚无文献报道。前期研究中我们应用基因芯片技术发现TRIM44下调可抑制BRCA1介导的DNA损伤修复通路的激活，应用质谱分析发现TRIM44与BRCA1的转录因子E2F1存在相互作用，并进行IP验证。因此，我们提出TRIM44与E2F1相互作用上调BCRA1表达，促进DNA损伤修复，最终诱导顺铂耐药的假说。拟采用单细胞凝胶电泳等分子生物学技术、裸鼠载瘤药物模型，人体组织标本，阐明TRIM44调控NSCLC顺铂耐药的生物学功能和机制。本课题以新视角研究顺铂耐药机制，可能为临床NSCLC患者逆转顺铂耐药提供精准的干预靶点。

一、背景：顺铂 (DDP) 为基础的化疗被认为是晚期非小细胞肺癌 (NSCLC) 的主要标准治疗选择之一。尽管在克服耐药性方面付出了很多努力，但顺铂治疗后复发率仍然很高。我们推测TRIM44参与顺铂耐药，为顺铂耐药的NSCLC患者提供潜在的治疗靶点。.二、主要研究内容：我们通过人NSCLC细胞系、人肺癌组织和裸鼠移植瘤模型，从分子、细胞、组织及动物整体水平等多方面探讨TRIM44在顺铂耐药过程中的重要作用，为逆转顺铂耐药提供新的理论基础。.三、重要结果： .1) 在SCI收录杂志上发表的课题相关学术论文9篇。.2) 揭示了TRIM44/FLNA/BRCA1介导顺铂耐药的机制。 .3) 培养1名博士及2名硕士研究生，并积极参加与课题相关的学术交流会议。.四、关键数据： .1) 在体外实验中，敲低TRIM44提高了细胞对顺铂的敏感性，过表达TRIM44则诱导了细胞顺铂耐药。.2) 基因芯片及分子生物学实验证实TRIM44调控BRCA1的表达及其在HR中的作用。.3) 在体外实验中证实TRIM44与FLNA相互作用并增强其稳定性，从而诱导顺铂耐药。.4) 通过小鼠移植瘤模型，我们验证了TRIM44/FLNA/BRCA1在顺铂耐药中的作用。.5) 在NSCLC患者标本中，TRIM44在顺铂耐药患者标本中呈高表达。TRIM44与FLNA、BRCA1表达呈正相关。.五 科学意义：.本项目通过实验揭示了TRIM44/FLNA/BRCA1轴是促进NSCLC细胞顺铂耐药的重要因素，为揭示顺铂耐药发生机制奠定基础，为临床患者的个体化治疗提供新的思路。