磷脂转运蛋白通过磷酸鞘氨醇1影响高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化功能的分子机制

高密度脂蛋白（HDL）生物学活性对其抗动脉粥样硬化功能与其血浆浓度一样重要。申请人前期研究发现，磷脂转运蛋白缺乏状态和载脂蛋白模拟肽的抗动脉粥样硬化作用与HDL的血浆浓度无关，但均明显地增强HDL的抗氧化、抗炎症和对血管内皮细胞保护等抗动脉粥样硬化功能。其机制不明。作为HDL脂质成分之一的磷酸鞘氨醇1具有显著的血管内皮保护生物学活性，而磷脂转运蛋白可能通过其脂质传递特性影响HDL的磷酸鞘氨醇1含量，从而对HDL功能产生影响。迄今国内外未见就上述假说的相关文献报道。前期实验通过对磷脂转运蛋白活性不同表达人群分析，发现磷脂转运蛋白活性水平与HDL磷酸鞘氨醇1含量负相关，且后者含量显著影响HDL抗氧化、抗炎症和内皮保护功能。本课题拟通过转基因鼠、体外细胞和脂蛋白重构模型的在体和体外实验探索磷脂转运蛋白影响HDL磷酸鞘氨醇1含量和其作用部位的分子机制。期待结果为心血管疾病的防治提供新的靶点。

本课题在建立串联质谱检测生物样本鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine-1-phosphate，S1P）基础上，分析了包括磷脂转运蛋白（phospholipid transfer protein, PLTP）等与高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)功能和代谢密切相关酶类对S1P及其信号途径和下游效应的分子机制的作用，也探讨了几种动脉粥样硬化危险因素对血浆和脂蛋白上S1P含量影响及相关机制。具体内容包括：（1）采用单级质谱和串联质谱对生物样本S1P定量检测；（2）探讨重组S1P-HDL颗粒对巨噬细胞胆固醇流出转运子的影响；（3）发现PLTP表达水平和活性状态对血浆中HDL颗粒S1P含量的作用及机制；(4)发现内外源性高脂血症对血浆S1P含量和分布有明确影响；（5）发现雌激素可影响血管内皮细胞分泌S1P，并对鞘氨醇激酶表达和活性产生影响。上述研究结果表明包括PLTP和雌激素等在内的多种因素均可改变S1P及其受体途径，可以为开发调脂和抗动脉粥样硬化等药物提供新的干预靶点。