C-RAF激酶结合蛋白RUVBL1在舌癌发生过程中的机制研究

Tongue cancer is a high incidence cancer worldwile. And it is the most common oral cnacer. It is a significant disease which could cause death. The treatment methods of tongue caner are not so effective until now. It is highly necessitous to investigate the complexity of signalling network of tongue cancer cells and to identify new therapeutic targets. .C-RAF kinase is a crosstalking point in cell signaling network, it regulates many physiological and pathological processes including tumorigenesis through its binding proteins. We have identified RAF kinase interactomes systematically and as an important binding protein, RUVBL1 has been identified. We will examine ERK signaling, cell differentiation, transformation, apoptosis and DNA synthesis through multiple perturbations of RUVBL1. And further we will investigate the effect of RUVBL1 on animal model of tongue cancer by multi-target perturbations. Our research will make clear the relationship between C-RAF kinase and RUVBL1 and find their function in the carcinogenesis of tongue cancer. Our work will identify new drug targets for C-RAF kinase and RUVBL1 related diseases, especially tongue cancer.

口腔癌是世界第六大常见癌，而舌癌是最常见的口腔鳞状细胞癌，是导致患者死亡的重要原因。但目前的治疗方法不够理想，急需对舌癌细胞信号传导的复杂性有进一步的了解，以发现新的治疗靶点。.C-RAF激酶，通过与众多结合蛋白的相互作用，调控着包括肿瘤发生在内的诸多生理、病理过程。本研究以互作蛋白组学的方法，对C-RAF激酶的结合蛋白进行分析，发现AAA+超家族成员RUVBL1为其重要结合蛋白。通过对RUVBL1的表达进行干扰，研究其对ERK信号、细胞分化、转化、凋亡和DNA合成的影响，拟建立舌癌动物模型，并通过基因突变等方法深入研究RUVBL1对C-RAF调控机制。本研究将为阐明C-RAF激酶及其结合蛋白相互作用机制及在舌癌发生过程中的作用奠定基础，为阐释C-RAF激酶及其结合蛋白的致癌机理提供新的线索，从而为治疗与C-RAF激酶及结合蛋白相关疾病，特别是舌癌提供全新的靶标。

口腔癌是世界第六大常见癌，而舌癌是最常见的口腔鳞状细胞癌，是导致患者死亡的重要原因。但目前的治疗方法不够理想，急需对舌癌细胞信号传导的复杂性进行深入了解，以发现新的治疗靶点。C-RAF激酶，通过与众多结合蛋白的相互作用，调控着包括肿瘤发生在内的诸多生理、病理过程。本研究以互作蛋白组学的方法，对C-RAF激酶的结合蛋白进行分析，发现AAA+超家族成员RUVBL1为其重要结合蛋白。成功构建了RUVBL1高表达及低表达的CAL-27及SCC-4舌癌细胞株，并对RUVBL1不同表达水平的两株舌癌细胞的增殖，迁移，侵袭，细胞干性能力进行研究。发现，RUVBL1高表达后，CAL-27及SCC-4增殖能力明显增加，迁移及侵袭能力也显著提高，细胞干性标记物CD44及CD133表达增强，细胞的成球能力增强；RUVBL1低表达后，CAL-27及SCC-4增殖能力明显减低，迁移及侵袭能力也显著下降，细胞干性标记物CD44及CD133表达减弱，细胞的成球能力下降；我们又对RUVBL1高表达及低表达的CAL-27细胞进行裸鼠成瘤能力的体内实验研究，发现RUVBL1高表达后，细胞成瘤能力显著提高，而RUVBL1抑制表达后细胞成瘤能力明显降低；通过进一步的药物敏感试验，发现RUVBL1高表达后，CAL-27及SCC-4细胞对临床常用化疗药物顺铂及5氟尿嘧啶的耐药性增强，而RUVBL1低表达后，CAL-27及SCC-4细胞对顺铂及5氟尿嘧啶的敏感性显著提高。通过机制研究，我们发现，RUVBL1可能通过调节C-RAF（Ser259）的磷酸化实现对C-RAF功能的影响来调控C-RAF/MEK/ERK细胞信号通路。由此可见，RUVBL1的表达水平对舌癌具有重要影响，通过改变其表达水平，尤其是抑制表达后，可以明显抑制舌癌的发生发展，该蛋白可能成为舌癌发生的“刹车蛋白”，本研究可望为舌癌的精准靶向治疗提供新的治疗思路！