FHL1通过抑制微管的形成负向调控细胞周期

FHL1 属于FHL家族，在肿瘤的发生发展中具有重要作用。我们利用免疫共沉淀、蛋白双向电泳和质谱技术获得了与FHL1结合的蛋白b-tubulin。b-tubulin是一种微管蛋白，在细胞中与a-tubulin形成异源二聚体，异源二聚体头尾相连聚合形成微管(Microtubule, MT)。微管结构的不稳定与肿瘤相关，抗微管类化疗药物在肿瘤治疗中发挥了重要作用。我们发现，FHL1在细胞内外都可与a/b-tubulin相互作用并能调节a/b-tubulin蛋白表达，FHL1过量表达抑制微管的恢复，并使细胞生长阻滞在G2/M期。我们将利用微管形成实验、免疫荧光技术、流式细胞技术、亚细胞定位分析、免疫组织化学技术、细胞生物学效应检测技术等确定FHL1在微管形成中的作用及机制，以及FHL1在肿瘤细胞周期调节中的作用及与tubulin表达相关性在临床上的意义，为发现新的抗微管类药物提供依据。

我们利用GST pull-down、免疫共沉淀和激光共聚焦实验证明了FHL1与a/b-tubulin及微管的相互作用，并进一步定位了它们之间相互作用的区域。进一步研究发现，FHL1在许多细胞系中都抑制微管的乙酰化，并发现FHL1抑制微管的乙酰化是通过促进FHL1与a-tubulin与HDAC6的结合实现的。因为微管的稳定性与其乙酰化相关，我们检测了FHL1对微管组装及稳定性的影响。体内外实验证明，FHL1抑制微管的形成和稳定。利用p38抑制剂以及RNAi干扰技术发现，FHL1通过调节MEKK4-MKK3-p38信号途径，促进tau的磷酸化，从而抑制微管的组装。