赤霉素促进针叶树开花的机理

用纯化CA-Hb3体外致敏大肠癌病人PBL后，提取mRNA反转录cDNA，以后者为模板为PCR扩增单链抗体scFv基因库，SfiⅠ酶切克隆入表达载体fUSE 5RF，并用CaCl2转化法和电穿孔法转入大肠杆菌，分别获得库容为10（4）和10（6）的两个初级抗体库。从初级抗体库中经过三次panning筛得3个A405值最高的克隆，即EL6D、EL5D和Cal2，通过细胞和癌组织免疫组化分析，结果表明：三个抗大肠癌scFv克隆与亲本抗体Hb3具有完全相同的结合特性。结论：我们采用的体外致敏法、噬菌体表面呈现技术和亲和筛选的策略，成功地将鼠源单抗Hb3人源化，为将来体内诊断和治疗大肠癌奠定了基础。