SCNN1A基因多态性与近足月儿/足月儿NRDS相关性研究及其SNPs功能验证

前期研究中发现部分近足月/足月RDS患儿，给予外源性PS疗效不佳，且此类患儿无感染或其他可能导致NRDS的危险因素，可能存在不同于早产儿RDS的发病机制。我们的最新研究表明，作为肺液经由上皮转运过程中核心部分的α-ENaC，还可通过抑制PS的活性而降低肺顺应性，在近足月/足月儿RDS发病机制中起着举足轻重的作用。而基因多态性是造成个体间α-ENaC 表达量和活性差异的一个重要原因。本课题拟对编码α-ENaC 的SCNN1A基因所有SNP位点进行分析，筛选出与近足月/足月儿RDS发病密切相关的SNP位点，并在生物信息学分析的基础上对SNP位点进行功能验证，以期从遗传学角度出发为近足月/足月儿RDS致病机理的阐明提供新思路，为α-ENaC表达量和功能异常致NRDS的具体机制揭示进一步奠定分子遗传学理论基础，同时可为临床上NRDS筛查寻找新的预警标志物。

本项目首先对不同胎龄RDS新生儿进行肺表面活性物质疗效比较，以期调查外源性肺表面活性物质替代治疗是否对所有RDS新生儿都有效。结果提示胎龄小于35周的早产RDS患者外源性肺表面活性物质替代治疗的疗效更佳，而对于近足月/足月儿并未取得预期疗效。除了肺表面活性物质缺乏和功能紊乱，可能存在其他因素在近足月/足月儿RDS的发病机制中发挥重要作用。值得进一步研究。基于α-ENaC可能通过影响肺表面活性物质活性和肺液吸收障碍而在新生儿呼吸窘迫中发挥重要作用的理论基础。我们利用iMLDR分型技术，检测了编码α-ENaC的SCNN1A基因中的7个SNPs，分析这7个SNPs与NRDS发病及其严重程度的相关性。1）SCNN1A基因3’Flanking区域的rs4149570位点的基因多态性与NRDS发病密切相关（卡方检验，P=0.034），此结果在校正了出生体重、胎龄和性别的logistic回归分析中也得到了证实(additive model: OR,1.500; 95%CI,1.026-2.193; P=0.037; Recessive model: OR, 2.386; 95%CI, 1.230-4.629; P=0.010)。2）在胎龄大于37周的新生儿中，除了rs4149570，位于SCNN1A基因intron4区域的rs7956915位点基因多态性与NRDS发病也密切相关(rs4149570: p=0.023; rs7956915: p=0.018)，而在早产儿中并未发现此相关性。3）在对各SNPs位点与NRDS严重程度相关性的研究中，我们并未发现与NRDS病情严重程度密切相关的任何SNP位点。4）根据本课题研究结果我们得出结论：SCNN1A基因的rs4149570和rs7956915位点基因多态性可能在中国汉族新生儿RDS发病机制中发挥着重要作用，尤其是对于足月儿RDS。本课题已按计划完成绝大部分研究内容，后续实验将从临床的角度验证携带易感基因型的NRDS患儿与肺液吸收障碍、α-ENaC mRNA表达水平之间的关系，目前已在进行中。已撰写英文论文两篇，均已投稿在评审中，协助培养博士研究生一名。