基于Eph/ephrin 信号通路探讨电针智三针对血管性痴呆大鼠海马神经元损伤的保护机制

Vascular dementia (VD) refers to the brain syndrome in acquiring intelligence damage as a result of the dysfunction caused by various cerebrovascular diseases, its pathogenesis has not been sure yet .In previous research, we found that by electroacupuncturing at zhisanzhen acupoints can improve VD rats’learning and memory.Studies have found that by activating or inhibiting Eph/ephrin signaling pathways we could regulate synaptic plasticity and repair infarcts and improve nerve function.However, whether Eph/ephrin signal pathways are associated with the improvements in the symptom of the VD by electroacupuncturing at zhisanzhen acupoints is unclear. On the basis of preliminary study combining with literature, we made our hypothesisthat the fact that electroacupuncture at zhisanzhen acupoints improved the mechanism of the VD rats’learning and memory is associated with Eph/ephrin signal pathway. To test this hypothesis, this project intended to use animal experiment, with the aid of in situ hybridization, Western blot, transmission electron microscopy,stereological analysis and other molecular biology and neurobiology research method. We studied the improvements electroacupuncture at zhisanzhen acupoints created in VD rats learning and memory, Eph/ephrin signaling pathways regulating synaptic plasticity from the positive and negative aspects. Our research is aimed at studying the pathogenesis of VD and what electroacupuncture at zhisanzhen acupoints could do and exploring the possible mechanisms of electroacupuncture at zhisanzhen acupoints’s improvements in rats’learning and memory and protection of neuron injury with VD, so as to find new ideas for the treatment of VD.

血管性痴呆（VD）是指由于各种脑血管疾病引起的脑功能障碍而产生的获得性智能损害综合征，其发病机制目前尚不确切。我们研究发现，电针智三针可改善VD大鼠学习记忆。研究发现，通过激活或抑制Eph/ephrin信号通路可调控突触可塑性，修复梗死灶、改善神经功能。然而，Eph/ephrin信号通路是否与电针智三针改善VD的症状有关尚不清楚。据此并结合文献，我们假说电针智三针改善VD大鼠学习记忆的机理与Eph/ephrin信号通路有关。为验证该假说，本项目拟采用动物实验，借助于原位杂交、Western-blot、透射电镜、体视学分析等研究手段，从正反两个方面，研究电针智三针改善VD大鼠学习记忆与Eph/ephrin信号通路调控突触可塑性的关系。旨在从细胞和分子水平，研究VD的发病机制和电针智三针的作用，探索电针智三针改善VD大鼠学习记忆、保护神经元损伤的可能机制，以期为VD的治疗找到新思路。

血管性痴呆(VaD)是老年期痴呆的主要类型之一，是由一系列脑血管因素导致脑组织损害引起的以认知功能障碍为特征的综合征。VaD严重危害中老年人健康，其发病机制尚未完全阐明。之前的研究表明，突触可塑性与学习记忆密切相关，Eph/ephrin信号通路可通过调控突触可塑性，进而调节神经系统功能。电针智三针如何通过Eph/ephrin信号通路调控突触可塑性，进而改善学习记忆，不得而知。.因此，本项目研究各组大鼠海马 CA1 区突触结构可塑性的变化及该变化与 Eph 受体/ephrin配体的表达,从突触结构可塑性的角度，分析海马微细结构的改变与 Eph 受体/ephrin 配体的相关性及电针智三针后的改变。研究各组大鼠海马CA1区突触功能可塑性的变化及该变化与Eph 受体 /ephrin 配体的表达。从突触功能可塑性的角度，分析海马长时程增强与Eph 受 体/ephrin 配体的相关性及电针智三针后的改变。.本项目研究表明：电针智三针可提高VaD大鼠学习记忆能力, 其机制可能与电针智三针调控海马CA1区EphA4/ephrinA3、EphB6/ephrinB1、EphA2/ephrinA1、EphB2/ephrinB3蛋白表达有关，也可能与其降低脑缺血后血浆炎症因子含量、抑制了海马CA1区神经元的凋亡和通过Eph/ephrin信号通路调控了突触可塑性有关。电针智三针也可通过增加海马CA1区EphB2和BMK1的表达，调控海马CA1区神经元损伤，从而达到改善VaD的学习记忆的作用。研究也表明：电针智三针可能通过下调血清S-100β、NSE、IL-6、CRP、IFN-γ、C1q、IL-18、C3a的含量，延缓海马神经元损伤，改善VaD大鼠的学习记忆。电针智三针可能通过增加海马Psd-95和Syp的表达，降低VaD大鼠海马Syt-4及其mRNA含量，从而改善Syt-4编码调控海马突触可塑性，减少神经元突触丢失，延缓海马神经元损伤，从而改善VaD的学习记忆。.本项目基于智三针能够有效改善痴呆的事实和电针的广泛应用，以VaD作为研究方向，制备VaD大鼠模型，以Eph/ephrin信号通路和突触可塑性作为研究的着力点，为揭示电针智三针改善VaD的机理，进行了有效的探索，有较高的学术价值和社会影响力，也具有积极的科学意义，将提高临床对智三针和电针疗法的认识，推动电针智三针在临床的使用。