腺病毒纤毛蛋白差异对3,7型腺病毒致病力的影响及机制研究

Human adenovirus (HAdV) serotype 3 and 7 are the most common pathogenic serotypes that cause respiratory tract infection in Chinese children. Studies indicated the two serotypes could cause different severity of pneumonia. According to the genomic analysis, the significant difference is located at fiber gene. Fiber induces HAdV to enter into host cell. CD46 is one of receptors to fiber, which expresses on immune cell widely and regulates the cleavage process of complement. In this study, we will build recombinant HAdV and use Q-PCR，Western blot，flow cytometry, immunofluorescence to explore: (1) the effect of fiber difference on infectious capacity of different serotypes；(2) the effect of fiber difference on disease development caused by different serotypes and CD46 relative mechanisms. We aim to demonstrate the important role of fiber in HAdV infection disease and provide academic reasons to intervene HAdV infection.

3,7型人腺病毒（Human Adenovirus，HAdV）是我国儿童呼吸道感染的最常见病原血清型。研究提示，两个血清型所导致的肺炎严重度存在差异。根据全基因组序列分析，两种血清型腺病毒仅在纤毛蛋白基因序列处存在明显差异。纤毛蛋白介导腺病毒的入胞，其受体之一CD46广泛表达于免疫细胞上, 且参与调节补体的裂解过程。本研究拟构建重组腺病毒，运用Q-PCR、Western blot、流式细胞术及免疫荧光技术等方法，探讨：(1)纤毛蛋白差异对不同血清型腺病毒感染细胞能力的影响；(2) 纤毛蛋白差异对不同血清型腺病毒感染后病情发展的影响及与CD46相关的潜在机制。以期阐明纤毛蛋白在腺病毒感染发病过程中的重要作用，为进一步干预腺病毒感染提供理论依据。

3,7型人腺病毒（Human Adenovirus，HAdV）是我国儿童呼吸道感染的最常见病原血清型。研究提示，两个血清型所导致的肺炎严重度存在差异。根据全基因组序列分析，两种血清型腺病毒仅在纤毛蛋白基因序列处存在明显差异。因此，我们推测腺病毒纤毛蛋白差异影响不同血清型腺病毒感染致病力不同，并进一步探讨其致病机制。（1）本课题研究发现重要病原体HAdV-7可有多个基因型致病，且一直处于进化过程中，其主要流行基因型由HAdV-7b变为HAdV-7d；（2）本课题通过HAdV3、HAdV7分别感染上皮细胞后，发现HAdV7在上皮细胞中的复制强于HAdV3；HAdV3和HAdV7共培养后，显示各时间点HAdV7复制能力强于HAdV3；HAdV3、HAdV7及重组腺病毒HAdV7h分别感染气道上皮细胞A549，证实HAdV7对上皮细胞的细胞毒性最强；（3）本课题通过HAdV3、HAdV7及HAdV7h分别感染BALB/c小鼠，证实HAdV7感染后致小鼠气道炎症、BALF中前炎症因子均高于HAdV3和HAdV7h；（4）研究发现腺病毒感染A549细胞后均能降低细胞膜上CD46、DSG-2表达，促进细胞核中CD46、DSG-2水平，其中HAdV7感染后最显著，进入细胞核中的HAdV7病毒多；进一步干扰CD46、DSG2后，均能减少腺病毒入胞。本课题研究证实纤毛蛋白差异可导致不同血清型腺病毒感染致病力不同，其机制可能是通过不同纤毛蛋白与结合受体CD46、DSG-2结合不同，进而而影响病毒入胞。标注本课题基金号的相关研究成果发表SCI论著2篇，CSCD核心论著1篇，CSCD扩展综述1篇，待投稿SCI论文1篇、CSCD核心论文1篇。培养博士研究生2名。