基于异病同治理论从RHO/ROCK通路探讨参蛤散对慢性心力衰竭的干预作用

Chronic heart failure , a syndrome characterized by systolic and diastolic dysfunction, is a progression accompanied with cardiac remodeling and fibrosis. Rho/ROCK signalling pathway which is involved in this progression plays an important role in the pathogenesis of heart failure..This study with heart failure model of pressure-overload is based on the pre-experiment of the significant effect of Shenggesan on the Rho/ROCK pathway. The aim of this study is to deeply demonstrate the role of Rho/ROCK pathway on the pathological progression of heart failure, illuminate the treatment effect and the possible effective target of Shenggesan, and the probable bidirectional modulation of Shenggesan to the Rho/ROCK pathway. Cell biology, molecular biology and serum pharmacology will offer us the technology of RT-PCR, Western-blot, RNA interference and hemodynamic testing to detect the key points of Rho/ROCK pathway..In traddionall Chinese Medicine(TCM), the theory of "treating different diseases with same method", "treating heart and lung with same method" and "kidney governing inspiration" provides us the theoretical basis of using Shenggesan to treat heart failure, which commendably explains the feature of TCM and provides a new way to treat and research heart failure.

慢性心力衰竭的病理变化是心脏的舒缩功能障碍，以及其后伴随的心血管重构，Rho/ROCK信号通路在慢性心力衰竭发生、发展过程中扮演重要的作用。. 本课题在建立大鼠压力负荷性心力衰竭模型以及证实参蛤散干预Rho/ROCK信号通路的基础上，以细胞生物学、分子生物学、血清药理学为平台，通过药物干预，采用定量RT-PCR、Western blot、基因干扰等技术，检测Rho／ROCK 信号通路信号通路中关键信号分子基因、蛋白的表达，以期从Rho／ROCK 信号通路深入揭示慢性心力衰竭发生的病理机制，阐释参蛤散治疗慢性心力衰竭的作用机理与有效作用靶点及其对Rho／ROCK 信号通路双向调节作用。本研究基于中医"异病同治"、"心肺同治"、"肾主纳气"的理论，运用参蛤散治疗慢性心力衰竭，体现了中医特色，亦为深入探讨慢性心力衰竭的机理机制和寻求新的防治策略提供了一种新的思路。

慢性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)是各种心脏疾病的终末阶段，中医中药治疗CHF有一定优势。本项目基于中医“异病同治”、“心肺同治”、“肾主纳气”的理论，采用参蛤散干预慢性心力衰竭。. 本研究分为动物实验和细胞实验2部分。动物实验方面，建立压力超负荷心力衰竭模型，随机分为假手术组、模型组、参蛤散组(1.89g.kg-1/d) 和法舒地尔组( 5mg.kg-1/d)，继续干预16 周后检测心脏超声、血流动力学、左心室重量指数( LVMI)、心肌病理、基因及蛋白表达。结果显示参蛤散能有效改善左室射血分数( EF) 、心室收缩期内径( LVIDs)、 左室指数（LVMI）、左室内收缩压（LVSP）、左室内压力最大上升速率（+dp/dt max）、左室内压力最大下降速率（-dp/dt max）(P<0.01、P<0.05)、抑制心肌肥厚作用，而对心率、血压无明显影响(P>0.05)。 . 细胞实验方面：原代心肌细胞培养，并运用AngII 孵育，建立稳定的心肌肥大细胞模型，将肥大的细胞随机分为对照组、模型组、法舒地尔组和参蛤散组，分别运用法舒地尔及参蛤散血清进行干预，并检测运用不同药物干预后心肌细胞直径、心肌细胞成活率、心肌细胞内钙离子浓度、心肌细胞凋亡情况以及Rho/ROCK 信号通路关键信号分子RhoA、ROCK、MLCP、MLCK 的基因、蛋白表达变化，最后运用基因干扰法沉默Rho基因，并将基因沉默后的心肌细胞随机分为对照组、RNAi 组、RNAi+参蛤散组、RNAi+AngII 组、RNAi+AngII+参蛤散组分别运用相应药物干预，检测各组细胞相应指标。结果显示，参蛤散能有效干预AngII诱导的心肌细胞肥大，提高心肌细胞成活率、降低心肌细胞内钙离子浓度、心肌细胞凋亡，干预肥大心肌细胞RhoA、ROCK、MLCP、MLCK 的基因、蛋白表达(P<0.01、P<0.05)。.可见，Rho/ROCK信号通路关键信号分子表达异常是形成心肌细胞肥大以及慢性心力衰竭的重要原因之一，运用古方参蛤散干预肥大心肌细胞，可降低心肌细胞凋亡率，提高生存率，其机制可能与干预Rho/ROCK信号通路有关。