自主知识产权的抗人CD14单抗人源化及其免疫毒素靶向杀伤M5的研究

急性单核细胞白血病（M5）预后不良，对化疗反应差。相对于化疗的严重毒副作用，单抗靶向治疗有良好的选择性和特异性。ZCH-7-2F9(2F9)是具有自主知识产权、国内唯一IgG1抗人CD14单抗，对M5细胞选择性好特异性高，国际上已被HLDA6正式认可，在国家自然基金资助下，其可变区基因及单链抗体研究工作已顺利完成。本课题拟利用已获得的2F9可变区基因将其部分人源化成嵌合抗体Ch2F9，通过双功能光敏偶合剂Sulfo-SANPAH在体外进行Ch2F9与酪氨酸激酶抑制剂Genistein的交联来完成Ch2F9-SANPAH-Genistein（Ch2F9-Gen)的研制，并建立以跨膜蛋白形式表达人CD14的白血病细胞株U937/mCD14，研究Ch2F9-Gen对U937/mCD14和M5细胞的靶向杀伤效果及作用机制，为临床靶向治疗M5奠定基础。

急性单核细胞白血病（M5）预后不良，对化疗反应差。相对于化疗的严重毒副作用，单抗靶向治疗有良好的选择性和特异性。ZCH-7-2F9(2F9)是具有自主知识产权、国内唯一IgG1抗人CD14单抗，对M5细胞选择性好特异性高，国际上已被HLDA6正式认可，在国家自然基金资助下，其可变区基因及单链抗体研究工作已顺利完成。本课题利用已获得的2F9可变区基因将其部分人源化成嵌合抗体Ch2F9，通过双功能光敏偶合剂Sulfo-SANPAH在体外进行Ch2F9与酪氨酸激酶抑制剂Genistein的交联等方法，成功完成Ch2F9-SANPAH-Genistein（Ch2F9-Gen)的研制，并建立以跨膜蛋白形式表达人CD14的细胞株Hela-CD14，通过研究Ch2F9-Gen对Hela-mCD14细胞的靶向杀伤实验，我们初步确定凋亡机制参与了Ch2F9-Gen对靶细胞的杀伤作用，该研究为2F9的抗体进一步的基因工程改造以及Ch2F9-Gen的临床靶向治疗M5奠定了基础。