蛋白激酶CK2与肺癌放射敏感性的关系研究

寻找放射抵抗的预测指标及放射增敏途径是肺癌放疗领域的关键课题。针对放射诱导的细胞损伤修复、周期阻滞和调亡等过程中关键调控分子的靶向研究，是肿瘤放射增敏领域的研究方向。CK2是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，可磷酸化300多种不同的底物。CK2的过表达在肺癌等多种肿瘤中普遍存在。通过对CK2磷酸化底物及相互作用分子的检索，申请者发现CK2可磷酸化及调节在放射诱导的细胞损伤修复、周期阻滞及凋亡中起关键作用的多种信号转导分子，如XRCC1/4、MDC1、p53和Chk2等；申请者提出假说：CK2与肺癌细胞的放射敏感性密切相关。本课题拟应用Western blot、流式细胞仪、MTT等技术，从放射诱导的DNA损伤修复、细胞周期阻滞和凋亡三个层面，全面探讨CK2在体内外肺癌细胞放射敏感性中的作用及其分子机制，并结合临床标本，为探寻肺癌放射增敏的有效靶点和肺癌放射抵抗的预测指标开拓新思路和提供理论依据。

针对放射诱导的细胞损伤修复，周期阻滞和凋亡等过程中关键调控分子的靶向研究，是肿瘤放射增敏领域的重要研究方向。蛋白激酶CK2是一种在肿瘤细胞中普遍存在的高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，可磷酸化300多种不同的底物，这些底物在信号转导和基因表达等过程中起重要作用。CK2与肺癌细胞的反射敏感性密切相关，本课题采用Western blot、流式细胞仪、MTT、克隆形成等技术，探讨CK2在肺癌细胞放射敏感性中的作用及其分子机制：（1）蛋白激酶CK2在不同非小细胞肺癌细胞系中高表达，在小细胞肺癌中低表达。收集临床病人组织标本，检测后发现CK2α在腺癌、鳞癌组织中均广泛表达；（2）通过Quinalizarin抑制CK2激酶活性可抑制肺癌细胞活力、迁移能力，增加γ-H2AX表达、ROS水平；（3）通过Quinalizarin抑制CK2激酶活性可通过周期阻滞、抑制DSB修复等途径增加肺癌细胞的放射敏感性。