不同矿物成因禹余粮品质的药效学评价及其“性涩”（止血、止泻）物质基础与作用机制研究

Property “Se” on hemostasis and antidiarrheal effect of Limonitum is reported effective on clinical curative. The chemical composition is inorganic elements and mainly exists in the form of ions. According to the previous studies and its chemical composition characteristics, based on the pathogenesis of bleeding and diarrhea, its action maybe interfere with the ions concentration inside and outside the body cells or act on the related ion second messenger to affect hemostasis and antidiarrhea effect related to blood coagulation mechanism, vascular factors, the body's immune function cytokines, platelet factor, cytokine of gastrointestinal digestion, absorption and secretion function, intestinal tissue neurotransmitters and intestinal environment, etc., including combined with metal protein after further activate the related enzymes. The type, relative content, valence state and combined with protein of ions entered the body are the key factors into full play. Pharmacodynamic evaluation on quality of Limonitum of different genetic types are firstly studied for high-quality mineral resources, using modern inorganic elements and their morphological analysis technology combining with the serum pharmacochemistry, study the type, relative content, valence state and combined with protein of ions entered the body, associated with pharmacodynamic effects, to reveals its pharmacodynamic substance foundation. Research on ion as a second messenger influence on blood coagulation and antidiarrheal way was to reveal the essence of property “Se” of Limonitum. This topic provides a method of thought to accelerate foundation research process of Chinese medicine mineral.

禹余粮“性涩”（止血、止泻）临床疗效确切，其化学成分为无机物且主要以离子形式存在。鉴于前期研究，根据其化学组成特点，基于出血、泻下发病机制，提出其作用可能是干扰体内细胞内外离子浓度或通过离子第二信使作用影响了与止血作用相关凝血机制、血管因素、血小板因素及与止泻作用相关机体免疫功能细胞因子、胃肠消化吸收分泌功能细胞因子、肠组织神经递质、肠环境等，包括与金属蛋白结合后进一步激活相关酶；其进入体内离子种类、相对含量、价态、与蛋白结合状态为其发挥效应的关键因素。本课题先对不同矿物成因禹余粮品质进行药效学评价，筛选优质矿产资源，利用现代无机元素及其形态分析技术及血清药物化学相结合的方法，研究其进入体内离子种类、相对含量、价态及与金属蛋白结合情况，并与药效相关联，揭示其效应物质基础；研究相关离子作为第二信使对凝血、止泻途径的影响，揭示其“性涩”的效应本质。本课题为加速矿物类中药基础研究进程提供了思路。

禹余粮具有涩肠止泻、收敛止血之功效，用于久泻久痢、大便出血、崩漏白带下，且疗效确切，然而其作用机制及物质基础仍不明确。本课题通过对不同矿物成因禹余粮的矿产资源筛选，采用现代无机元素分析技术、血清药物化学和肠道菌群相结合的研究方法，阐明禹余粮止血、止泻的作用机制及药效物质基础：（1）通过对不同地质成因的禹余粮进行性状和矿物成因鉴别，采用偏光显微镜及X射线衍射技术对禹余粮样品的矿物成分进行分析，各矿物成因禹余粮的成分组成及含量差异较大，针铁矿的含量以沉积型禹余粮最多，淋滤浸染型次之，蚀变残留型最少，其中蚀变残留性的赤铁矿含量还高于针铁矿，不宜入药。（2）根据矿产资源筛选研究，选取沉积型和淋滤浸染型两种成因的禹余粮进行止血、止泻作用的药效学评价，结果两种成因的禹余粮都具有止血、止泻作用，但沉积型禹余粮的止血作用较好，淋滤浸染型禹余粮的止泻作用较好。（3）华法林出血模型和蓖麻油腹泻模型，分0天、5天、10天、15天4个时间点大鼠眼眶取血，利用ICP-OES、ICP-MS分析给药前后血清中金属元素的种类、含量或相对比例等变化情况，并进行药效关联性分析。结果表明4个时间点金属元素在体内均有差异性，且给药时间越长具有差异的元素越多。禹余粮药材粉末、水煎液中以砷酸根为主，进入体内后血清中以亚砷酸为主。（4）选择沉积型禹余粮进行止血作用机制研究，以血管因素、血小板因素及凝血途径为切入点，检测禹余粮对6酮前列腺F1a、花生四烯酸、内皮素-1、血小板活化因子、P-选择素、血栓素B2、Ca离子、p-AKT-A蛋白表达等的影响，对禹余粮所干预的因子类型与之关联性分析，研究沉积型禹余粮止血的作用机制。选择淋滤浸染型禹余粮进行止泻作用机制研究，通过研究大鼠结肠中水通道蛋白、空肠中5-HT、尿液中D-木糖含量的影响，并结合对腹泻小鼠肠道菌群及短链脂肪酸以及毛细血管通透性的影响，从多方面、多角度阐明淋滤浸染型禹余粮止泻的作用机制。本研究为矿物类中药研究提供思路。