ROS敏感纳米粒靶向释放SDF-1趋化归巢移植的EPC治疗肢体电烧伤

血管损伤及修复是决定电烧伤预后的重要因素，后者主要通过内皮祖细胞（EPC）在损伤局部分化为血管内皮细胞来实现。循环中EPC游走并归巢主要取决于基质细胞衍生因子-1(SDF-1）的趋化，如何在局部形成高浓度SDF-1对修复至关重要。预试验表明局部SDF-1浓度随着电烧伤严重程度增加而下降。复合纳米粒材料为生物制剂的靶向释放提供了有效途径。本项目拟制备兔肢体电烧伤模型，根据电损伤局部过氧化损害特性，实现活性氧(ROS)敏感纳米粒携带SDF-1的靶向释放。体外分离培养鉴定和扩增EPC；制备携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的慢病毒载体，体外转染EPC，检测其增殖分化、血管形成及抗凋亡能力。体外制备包裹SDF-1的ROS敏感纳米粒，对其表征和性能鉴定。对电烧伤兔进行自体EGFP-EPC移植治疗，并输注携带SDF-1的纳米粒，观察EGFP-EPC在局部归巢及损伤肢体的组织转归情况，评价移植疗效。

血管损伤及修复是决定电烧伤预后的重要因素，后者主要通过内皮祖细胞（EPCs）在损伤局部分化为血管内皮细胞来实现。循环中EPCs游走并归巢主要取决于基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α）的趋化，如何在局部形成高浓度SDF-1α对修复至关重要。预实验表明局部SDF-1α浓度随着电烧伤严重程度增加而下降。复合纳米粒材料为生物制剂的靶向释放提供了有效途径。. 本项目制备大鼠肢体电烧伤模型，根据电损伤局部过氧化损害特性，实现活性氧(ROS)敏感纳米粒携带SDF-1α的靶向释放。体外分离培养鉴定和扩增EPCs；制备携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的慢病毒载体，体外转染EPCs，检测其增殖分化、血管形成及抗凋亡能力。体外制备包裹SDF-1α的ROS敏感纳米粒，对其表征和特性进行鉴定。对肢体电烧伤动物模型输注携带SDF-1α的纳米粒，观察EGFP-EPC在局部归巢及损伤肢体的组织转归情况，评价移植疗效。. 我们已合成分子量约11.5KDa、离散度为1.97的具氧自由基活性的高分子有机化合物PPADT。以PPADT为载体包封SDF-1α，制备具氧自由基活性载SDF-1α的纳米粒，其粒径110nm左右，载药量为1.8%，包封的SDF-1α活性略降低。纳米粒在氧自由基存在时可缓释包封的SDF-1α，在实验动物损伤部位有明显的SDF-1α靶向释放效应，能促进EPCs向损伤局部趋化，促进血管化，加速愈合。. 本课题针对如何促进电烧伤组织血管修复的问题，将再生医学的干细胞治疗与局部趋化因子的靶向释放相结合，实现了移植的内皮祖细胞在损伤局部的归巢，为电烧伤及其他组织损伤和血管病变的研究和应用提供了新思路。