紫外辐射引起角膜上皮细胞凋亡的分子机理研究

本项研究着重于探讨紫外辐射引起眼睛角膜上皮细胞凋亡的分子机制。首先通过细胞凋亡的形态学检测及生物化学反应确定紫外辐射时间和强度对角膜上皮细胞凋亡的影响；通过bcl-2和bax基因表达的蛋白，来测定紫外辐射引起的细胞凋亡是否是由FKHR-L1途径引起的，并通过测定caspase-3酶的活性，来进一步验证细胞凋亡的分子机制。由于很多细胞凋亡都与超氧阴离子自由基相关，因此通过MTT比色法测定超氧阴离子自由基，进一步测定SOD（超氧化物活化酶），以得到超氧阴离子自由基的水平。.实验课题的选择针对了人们日益关心的臭氧层变薄、紫外辐射变强、对人类伤害日趋严重的问题，至今国内外尚未有紫外辐射引起角膜上皮细胞凋亡分子机制的系统研究报道，因此具有很强的实际应用性和创新性。该项研究的开展不但可以揭示紫外辐射引起角膜上皮细胞凋亡的生物学机制，而且还将进一步为辐射预防医学提供理论参考依据。

本项研究以Wistar大鼠为实验材料，力争揭示紫外辐射引起眼睛角膜上皮细胞凋亡的分子机制，从理论上探讨角膜上皮细胞在凋亡过程中的细胞分化、转变和相互作用。采用国际上先进的研究方法，通过Annexin-V法和PI法匹配实验以及DNA梯度实验，将死亡细胞和凋亡细胞以及凋亡早晚期细胞加以区分；并通过角膜细胞在凋亡过程中特异基因bcl-1/bax的表达、Caspase-3活性的检测以及超氧阴离子自由基（O2-）水平的分析测定，对眼睛角膜上皮细胞凋亡以及细胞分化作进一步分析研究，在分子水平上揭示角膜上皮细胞凋亡的生物学机制。 .本项研究取得了以下几个方面成果：（1）揭示并对比紫外辐射时间和强度对角膜上皮细胞以及角膜基质细胞凋亡的影响；（2）阐释紫外辐射引起角膜上皮细胞凋亡的分子机制； .（3）建立系统研究角膜上皮细胞凋亡以及角膜诱导分化的实验体系。.在国内外核心期刊发表研究论文4篇，其中SCI源期刊发表2篇,并在国内外学术会议上交流。结合本项研究内容培养硕士、博士研究生4人。