一个新的酪氨酸激酶受体RON的剪接变异体在结直肠肿瘤发生/发展中的作用研究

酪氨酸激酶受体RON的变异体在结直肠肿瘤的转移过程中发挥了重要作用，到目前为止已有6个和肿瘤相关的RON的变异体被发现，其中4个能促进肿瘤转移，已经有近6年没有具有促肿瘤转移功能的RON变异体被发现。在我们最近的研究中我们发现了一个新的变异体，该变异体是在一个大肠癌肝转移组织中被发现的，在正常肠粘膜组织中未见表达，因此预计其功能可能和肿瘤转移有关。经测序结果发现缺失了外显子2和3，共计318个碱基，也就是缺少了106个氨基酸，因此我们初步将其命名为RON106。我们拟根据该变异体建立表达载体，并使其在上皮细胞及结肠肿瘤细胞中稳定表达。测定该变异体的分子量大小、表达部位、磷酸化情况等分子生物学特征。并且通过细胞实验和裸鼠实验测定RON106在肿瘤形成、肿瘤移动等方面的功能。同时收集结直肠癌原发及转移标本，检测RON106的表达情况，分析其和肿瘤病理分期及预后的关系。

根据我们现有的研究，我们新发现的变异体RON106其分子量大小约160Kd，在多个结直肠癌及胃癌细胞系中可发现RON106的存在。我们在上皮细胞HEK293和结肠肿瘤细胞Colo320中建立稳定表达RON106的细胞系。并对RON106的分子量大小、磷酸化情况进行检测，在稳定转染的细胞系293RON106中，RON106在细胞浆内表达，并以pro-∆RON的形式存在。不论有无MSP的刺激其酪氨酸区域均不发生磷酸化，但能引起其下游的AKT激活。我们还发现RON106缺乏酪氨酸激酶的活性却能促进细胞移动能力的增加，且抑制PI3-K/AKT途径会降低RON106引起的细胞移动，其机制可能和PTEN/mTOR途径有关。集落形成试验未发现RON106具有致瘤作用，说明RON106可能是在肿瘤的进展中发挥作用，在肿瘤的形成过程中可能没有决定性的作用。.以转染Colo320的RON106细胞行裸鼠实验，结果没有发现RON106能促进肿瘤细胞转移的作用。收集结直肠癌的原发及转移标本，检测RON106的表达情况发现RON106在结直肠癌中的表达比例约为46%，且与肿瘤的T分期及N分期有关，但与M分期以及分化程度等无明显关系。说明RON106可能与促进肿瘤局部进展相关，与远处转移无关。