阿尔茨海默病“毒损脑络”生物模型构建及有效中药组分筛查

It is Chinese medicine pathogenesis of Alzheimer’s disease that toxin hurts brain collaterals. Whereas, the pathological basis that toxin hurts brain collaterals is that Aβ aggregates and impairs blood-brain barrier. In previous study, we have successful construction blood brain barrier co-culture model in vitro and found that Bushenyijing contained serum can inhibit impairment of blood-brain barrier caused by Aβ. In this study, we build toxin-hurt-brain-collaterals model based on Aβ impairment model of blood-brain barrier in vitro and screen effective Chinese medicine components through the model, then treat the toxin-hurt-brain-collaterals animal models using the Chinese medicine components screened. Moreover, the brain collaterals impairement is analyzed by fluorescein isothiocyanate (FITC)-albumin leakage assay and the effect of the Chinese medicine components is evaluated by behavior change of the animal models. The result of this study can provide Alzheimer’s disease biological models for Chinese medicine.

“毒损脑络”是阿尔茨海默病的中医病机；Aβ聚集损害血脑屏障及其功能是阿尔茨海默病“毒损脑络”病机的病理基础；我们前期研究成功构建血脑屏障体外共培养模型，并发现补肾益精方含药血清对Aβ损伤的血脑屏障模型有保护作用。本课题运用Aβ损伤的血脑屏障模型构建“毒损脑络”体外模型，并运用该模型筛查有效中药组分，将筛查出的有效中药组分应用到 “毒损脑络”动物模型，以荧光标记白蛋白评价“脑络”损伤程度，并以行为学评价中药组分的疗效，为研究阿尔茨海默病中药提供符合中医理论的研究模型。

阿尔茨海默病（AD）目前尚未有效的治疗药物。“毒损脑络”是AD的中医病机；Aβ沉积损害血脑屏障及其功能是AD“毒损脑络”病机的病理基础。本课题运用Aβ损伤的血脑屏障模型构建“毒损脑络”体外模型，并运用该模型筛查有效中药组分，将筛查出的有效中药组分应用到“毒损脑络”动物模型，并从行为学及脑组织病理等方面评价中药组分的疗效。.我们成功构建AD“毒损脑络”体外模型，并运用该模型筛查10余种中药及10种中药单体，发表论文14篇，其中SCI论文3篇，核心期刊论文9篇，其它论文2篇。.我们研究发现山茱萸提取物莫诺苷可以下调PC12细胞中MAPKs的磷酸化，减少细胞凋亡，同时抑制Aβ1-42或H2O2诱导p-JNK和p-p38 MAP上调，从而对H2O2诱导的PC12细胞起保护作用。菟丝子提取物金丝桃苷抑制Aβ1-42引发的凋亡通路的激活，缓解Aβ1-42诱导的血脑屏障破坏。地黄提取物梓醇通过调节相关凋亡及自噬蛋白的表达以抑制Aβ1-42介导bEnd.3 细胞的凋亡，进而保护血脑屏障结构的完整性及功能的正常运行。生地黄水煎剂黄芪甲苷、白术内酯、覆盆子水煎剂、楮实子水煎剂、海风藤水煎剂可以抑制凋亡相关蛋白的表达，抑制Aβ1-42诱导的bEnd.3细胞氧化应激损伤，抑制血脑屏障通透性增加。芍药苷能抑制Aβ1-42诱导的血脑屏障通透性增加，且能明显提高 bEnd. 3的细胞活力。AD转基因动物研究显示：高剂量补肾益精方疗效非常明显。.总之，本课题完成：1. 阿尔茨海默病“毒损脑络”体内外模型的构建方法及评价体系；2. 筛查出符合中西医理论，对阿尔茨海默病有效的中药单体，并对其作用机制进行深入研究；3. 发表论文14篇，其中SCI论文3篇，核心期刊论文9篇，其它论文2篇。培养硕士7名，在读博士3名。4. 即将申报治疗阿尔茨海默病专利药物1项。