JAK/STAT通路在缺血预处理中对大鼠心肌细胞端粒酶逆转录酶的调控及中药干预研究

如何更有效的激活心肌细胞端粒酶逆转录酶, 促进细胞再生和延缓缺血再灌注细胞凋亡，是对抗缺血后再灌注损伤的关键。缺血预处理是最有效的内源性保护机制，其作用与JAK/STAT通路密切相关。目前未见JAK/STAT通路与TERT的调控研究。本项目的实施将为临床应用外源性端粒酶激活剂治疗缺血性心脏病提供理论依据，并对开发广西特色药用资源，促进广西贫困山区经济的发展，促进广西的地方人才培养，有十分重要意义。.本项目采用缺血再灌注模型。以缺血再灌注损伤为对照，观察缺血预处理、加味丹参饮预处理及加用JAK抑制剂、STAT抑制剂后两者对缺血再灌注心肌的保护作用。通过检测TERT mRNA、端粒长度、JAK/STAT的表达、凋亡细胞、凋亡调控基因及蛋白、转录因子c-myc,SP1mRNA，阐述JAK/STAT信号传导通路在缺血预处理中对端粒酶逆转录酶的调控作用及加味丹参饮预处理对缺血再灌注心肌的保护机理。

缺血预处理（IPC）是一种强有力的心肌保护因素，阐明其机理对冠心病防治有重要意义。JAK/STAT信号转导通路参与了缺血再灌注（I/R）的保护，但目前国内外对JAK/STAT在IPC中的作用机理尚不清楚。因此，研究JAK/STAT在IPC中的保护作用机制对进一步阐明IPC的机理具有重要意义。IPC毕竟是一种损伤性的过程，临床应用受限。因此研究中药预处理的作用，将为冠心病的防治提供新的治疗手段。加味丹参饮是由丹参饮基础上加川芎、赤芍、当归、黄芪、扶芳藤、青蒿、黄连等药化裁而成等组成，前期研究表明加味丹参饮对冠心病有较好防治作用。本项目的实施不仅对进一步阐明IPC的信号转导通路具有重要意义，而且对将加味丹参饮开发成防治冠心病的中药新药，开发我区特色药用资源，促进我区贫困山区经济的发展，有十分重要意义.选用Wistar大鼠，建立心肌梗死模型，给予加味丹参饮预处理，以缺血预处理（IPC）为对照，进行缺血再灌注（I/R）。实验结束，以缺血心肌梗死面积、JAK、STAT、c-myc、sp-1、bax、bcl-2等为观察指标，观察JAK/STAT在心肌梗死大鼠心肌缺血预处理中的作用及加味丹参饮干预作用。结果显示（1）相同条件下，在加入JAK抑制剂后，缺血面积相应增多，说明JAK/STAT通路与IPC密切相关（2）加入JAK抑制剂后，STAT的表达相应减少，说明JAK蛋白对STAT的表达有调控作用（3）加入STAT抑制剂后，JAK蛋白也会减少，说明STAT对JAK蛋白也有反馈调节（3）加入myc抑制剂后，STAT，JAK的表达也会减少，说明myc基因参与调节STAT蛋白表达（4）加味丹参饮预处理对心肌缺血再灌注的损伤有保护作用，减轻心肌缺血再灌注损伤,降低心电图抬高的ST段,改变心肌细胞的病理形态学，其机制与JAK/STAT转导通路的干预有关，加味丹参饮预处理通过激活JAK/STAT转导通路，上调c-myc基因的表达，调节Bax/Bcl-2,参与心肌细胞凋亡的保护。