细菌脂多糖上调胆管上皮细胞粘蛋白MUC5AC表达的分子机制

胆道感染和胆管上皮细胞粘蛋白的高表达在肝胆管结石的形成过程中具有重要作用，但其调节机制尚不清楚。我们在前期研究工作基础上提出模式识别受体TLR4可能通过与PKC-Duox1-ROS-TACE-TGF-α-EGFR通路的信号串话来调控细菌脂多糖（LPS）诱导的胆管上皮细胞MUC5AC的表达。本课题以LPS干预的胆管上皮细胞、转染MUC5AC基因的胆管癌细胞、转染TLR4和Duox1 siRNA的胆管癌细胞为研究平台，结合PKC、Nox抑制剂和ROX清除剂的干预，检测信号通路中H2O2的生成、TGF-α的水平、MUC5ACmRNA和蛋白的表达及MUC5AC的转录活性，探讨TLR4-PKC-Duoxl信号通路在LPS诱导胆管上皮细胞MUC5AC表达上调中的分子机制，为抑制胆管粘液高分泌成为肝胆管结石病新的预防和治疗靶点提供理论和实验依据。

既往研究证实在呼吸道中内毒素（LPS）可上调粘蛋白MUC5AC表达。然而胆道中关于细菌感染与粘蛋白分泌异常的研究并不清晰。本课题通过培养人肝内胆管上皮细胞，并加入LPS或其他干预剂刺激，检测细胞上清中H2O2以及MUC5AC表达。结果提示H2O2产量与LPS浓度称浓度依赖关系，LPS可诱导MUC5AC在mRNA和蛋白水平高表达，而特殊抑制剂可抑制这种表达。因此我们认为LPS可诱导MUC5AC高表达，ROS、Nox及PKC参与了这个过程。