hTERT通过ITGB1促肿瘤转移的分子机制研究

端粒酶逆转录酶（hTERT）与肿瘤转移的关系少有研究.我们既往发现hTERT转染可增强端粒酶阴性肿瘤侵袭转移;并证实hTERT转染可通过上调整合素β1(ITGB1)表达来增强肿瘤细胞与ECM的粘附，但hTERT上调ITGB1的机制尚不明.前期采用miRNA芯片发现hTERT可上调miR-124,miR-506和miR-183，文献已报道miR-183可通过转录后调控影响ITGB1的表达，生物信息学发现上述miRNA可与ITGB1 3'UTR结合，提示miR-124和miR-506亦可通过转录后调控影响ITGB1表达。本研究拟采用双荧光素酶实验证实上述miRNA是否能够结合ITGB1 3'UTR;研究上述miRNA慢病毒对肿瘤细胞体内外转移的影响，以期阐明hTERT可通过下调上述miRNA来增强ITGB1的表达，从而促进肿瘤转移。本课题的实施将丰富人们对hTERT在肿瘤发生发展中作用的认识。

本课题基本按照计划进行，未作较大变动。蛋白组学技术发现hTERT上调ITGB1的表达，基因芯片和生物信息学分析发现miR-29可能调控ITGB1，同时又在U2OS/hTERT细胞中表达下调。miR-29家族三条miRNA在胃癌中的表达水平均明显低于癌旁组织，但是只有miR-29a与病人临床预后密切相关。进一步实验研究发现miR-29a可以与ITGB1 3’UTR结合，并能下调胃癌细胞里ITGB1 的蛋白表达水平；用含hTERT干扰的质粒转染胃癌细胞，再用antagomir抑制miR-29a的表达以及用慢病毒过表达hTERT，再用mimics过表达miR-29a后再用Western Blot检测ITGB1的表达变化等实验证实hTERT是通过抑制miR-29a来上调ITGB1的表达，从而促进肿瘤的转移。. 在本课题资助下完成的部分研究结果已经在国内核心医学期刊上发表论文1篇；以研究论文的形式拟投送到MOLECULAR CANCER RESEARCH杂志；本课题培养博士生一名，于明年毕业。