马桑水提取物促进烧伤创面愈合与抑制病理性瘢痕增生的机制

At present, it's a major problem to treat burn wound with modern medicine that controls infection, promotes healing and inhibits pathological scar hyperplase.The common silver sulfadiazine can only be used for controlling wound infection of burn in clinical, but can not be used for promoting healing and inhibiting pathological scarring.The Coriaria Sinica Maxim's Extract (CSME) has been used for the treatment of durable ulcer of skin and wound healing of burn in civilian of China.It is reported that some of common drug-resistance bacteria of burn wound can be significantly inhibited by the CSME.Recently，our experiments have discovered its promotion effect on burn wound healing in rats and inhibition of pathologic scar hyperplase in rabbit ears. In the study, some of molecular biology methodes will be used for explaining its acting mechanisms from molecular level. The immunohistochemistry staining, ELISA, RT-PCR and Western bloting will be used in the study for detecting of effects,such as on the expressions of nucleoprotein that are encoded by the c-myc,Smad3,E-selectin and integritin；on the formation and differentiation of keratinocyte that is regulated by the downstream molecules Tcf3 and Lef1 of the Wnt signaling pathways；on the Jun signaling pathways of type Ⅰ-collagenase activity that is expressed and regulated by γ-IFN,etc. The study will be used for providing theoretical foundation and experimental evidences for mechanisms of wound healing and scarring.Triple effects of the CSME will make new progress for burn treatment in controlling wound infection, promoting wound healing and inhibiting pathological scar hyperplase.

目前控制烧伤创面感染、促进创面愈合和抑制病理性瘢痕增生是现代医学的一大难题。临床常用的磺胺嘧啶银只能控制创面感染，没有促进烧伤创面愈合和抑制创面病理性疤痕增生作用。在中国民间，马桑水提取物被用作治疗经久不愈的皮肤溃疡和烧伤创面愈合。有报道其对烧伤创面常见感染耐药菌有显著抑制作用。我们最近实验发现其有促进大鼠烧伤创面愈合及抑制兔耳病理性疤痕增生作用。本课题将用免疫组化染色、RT-PCR和Western Blot等方法，从分子水平解释其作用机制。如对c-myc、Smad3、E-selectin编码的核蛋白的影响；对Wnt信号经下游分子Tcf3和Lef1调控角质形成细胞形成与分化的影响；对γ-IFN表达调控的jun信号途径而影响Ⅰ-型胶原蛋白酶活性等。本研究将为烧伤创面修复和病理性瘢痕增生的机制提供理论基础和实验依据，其控制创面感染、促进创面愈合和抑制瘢痕增生的三重作用将为烧伤治疗带来新进展。

一、研究背景：本项目是2013年申报的国家自然基金项目（地区科学基金项目）。该项目是在目前控制烧伤创面感染、促进创面愈合和抑制病理性瘢痕增生是现代医学的一大难题，而目前临床常用的磺胺嘧啶银只能控制创面感染，却没有促进烧伤创面愈合和抑制创面病理性疤痕增生作用的基础上提出的。.二、主要研究内容：本课题用免疫组化染色、RT-PCR和Western Blot等方法，从分子水平解释了其相关作用机制。具体包括：CSME促进烧伤创面愈合的机制（调控角质形成细胞的形成与分化），包括：①CSME对integrin或c-myc基因表达的影响 (直接调控)；②CSME对Wnt信号传导的影响（通过下游分子Tcf3和Lef1间接调控）。CSME抑制烧伤创面病理性瘢痕增生的机制，包括：①CSME对Smad3基因表达的影响（调控TGF-β1信号途径）；②CSME对γ-IFN表达的影响（调控Jun信号途径）。CSME抗菌作用机制。.三、重要结果与关键数据：研究发现，1. CSME影响SOD 活性和MDA 含量，阻止细胞凋亡；2. CSME调控烧伤创面EGF和bFGF蛋白水平；3. CSME调控烧伤创面Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达；4. CSME对烧伤创面感染的常见3种耐药菌具有抑制作用（ATCC29213、ATCC27853和ATCC25922），其机制包括：调控相关靶基因的表达与转录，下调PBPs 表达；下调转运子基因的表达与转录，干扰药物的主动外排；上调 lytM和下调llm基因表达与转录，促细菌自溶死亡；CSME的多成分稳定结构致使细菌水解酶难以发挥作用；上调ribA表达，影响细菌核黄素合成；影响与应激有关的核酸甲基化酶基因表达。5. 创面修复早期CSME增加NO合成、SOD和VEGF活性，减少ET和MDA含量，而促进创面愈合，后期则呈剂量依赖性抑制NO和VEGF活性，增加ET合成而减轻瘢痕组织填充。6. CSME干预ILK调控的IG-β1与TGF-β1信号通路、影响PI3K-ILK-AKT调节的ILK互通信号传导及ColⅠ与Col III表达比的调控。.四、科学意义：烧伤患者常见的并发症就是创面感染、创面早期愈合和创面瘢痕过度增生，是威胁患者生命、创面愈合延迟和创面畸形愈合的重要原因。CSME有可能成为有效控制烧伤创面多重耐药菌混合感染，早期促进烧伤创面愈合，后期抑制瘢痕增生的新型药物。