microRNAlet-7b通过其靶基因调节羊驼毛生长的研究

羊驼是毛用型经济动物，其耳部和背部的毛发品质和生长周期存在差异。已有研究发现羊驼耳部和背部皮肤中高表达差异2倍以上的miRNA39个，其中let-7b在背部皮肤中的表达量显著高于耳部，生物信息学软件预测let-7b的靶基因中与毛发生长发育有关的12个，其中FGF5和IGF-1R与毛发品质和生长密切相关。本研究首先从mRNA水平和蛋白质水平分别确定FGF5和IGF-1R两个基因在羊驼耳部和背部的表达是否存在差异，通过构建let-7b靶基因序列的双荧光素酶报告载体验证let-7b与靶基因之间的关系，从而确定let-7b通过调节靶基因的表达调控羊驼毛生长发育的机制，为从转录后水平研究羊驼毛发生长提供理论依据。

羊驼是毛用型经济动物，其耳部和背部的毛发品质和生长周期存在差异，本课题组前期研究发现microRNA let-7b在羊驼背部皮肤中的表达量显著高于耳部，生物信息学软件预测到let-7b的靶基因中与毛发生长发育有关的12个基因。本项目以其中的胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、成纤维细胞生长因子5（FGF5）、转化生长因子-βⅠ型受体（TGFβRⅠ）、外异蛋白（EDA）为研究对象，研究IGF-1R、FGF5、TGFβRⅠ、EDA等对羊驼毛的作用、验证let-7b与它们的靶向关系、let-7b通过它们调控羊驼毛生长发育的机制，为从转录后水平研究羊驼毛发生长提供理论依据；同时本项目还研究了角蛋白71（KRT71）、EDA受体（EDAR）等与羊驼毛发和绵羊毛发性状形成的相关性，为改良羊驼和绵羊毛品质提供理论基础。研究结果如下：.1、在蛋白质和基因水平，FGF5、TGFβRⅠ、EDA在羊驼背部和耳部皮肤中的表达均存在差异，均为耳部高于背部；let-7b与FGF5、TGFβRⅠ、EDA之间分别存在靶向作用关系，且let-7b均通过下调FGF5、TGFβRⅠ、EDA的表达，调控羊驼毛生长发育。.2、IGF-1及其受体IGF-1R对羊驼毛的生长有促进作用，但IGF-1R在羊驼不同部位皮肤中的表达无明显差异；let-7与IGF-1R之间不存在靶向关系。.3、在蛋白质和基因水平，KRT71、RSPO2、β-catenin的mRNA和蛋白表达量均呈现：背部﹥腿部﹥耳部的趋势，提示KRT71与毛纤维的弯曲度、细度、长度呈正相关，KRT71、RSPO2、β-catenin可能在羊驼毛以上性状形成中发挥了作用。.4、在蛋白质和基因水平，EDAR在绵羊不同部位皮肤中的表达差异显著，依次为背部﹥耳部﹥腹股沟部。提示EDAR可能参与了绵羊毛发卷曲的形成，对绵羊毛发的生长速度、疏密度也具有一定的作用。.5、IGF-1、IGF-1R、NGF、VEGF、FGF-5等生长因子在小鼠被毛的生长过程中都具有作用，但在不同的生长时期主要影响因子不同。.以上研究结果为提高毛用动物毛发生长速度和改良毛发品质奠定了理论基础。