外泌体介导的circ-0076303在乳腺癌侵袭转移中的作用及机制研究

Breast cancer is the most common malignant tumor in women worldwide. Most breast cancer patients die from distant metastasis. Therefore exploring new mechanism and searching for new targets of breast cancer become especially important for metastatic breast cancer treatment. .Our preliminary investigation shows that exosomes from aggressive breast cancer cells are enriched with circ-0076303, which can increase invasiveness and up-regulate ADAM19 of less aggressive breast cancer cells, and weaken the tight junctions among stromal cells. Therefore we propose a hypothesis that exosomes up-regulate ADAM19 to increase invasiveness of breast cancer cells and destroy tight junctions among stromal cells through delivering circ-0076303. We will further study how circ-0076303 mediated by exosomes regulates ADAM19, whether circ-0076303 could be a marker of metastatic breast cancer, and whether circRNA mediated by exosomes could be used in gene therapy of breast cancer. This project proposes that circRNAs within exosomes promote invasion and metastasis of breast cancer for the first time, which provides new perspective for breast cancer research and new methods for breast cancer therapy.

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，远处转移是造成乳腺癌患者死亡的主要原因。因此迫切需要探索乳腺癌转移的新机制并藉此寻找治疗转移性乳腺癌的新靶点。我们在前期研究发现高侵袭性乳腺癌细胞外泌体介导circ-0076303通过上调ADAM19的表达而增加低侵袭性乳腺癌细胞的侵袭性。结合文献报道我们提出假设：外泌体介导的circ-0076303通过调控ADAM19的表达来增加乳腺癌细胞的侵袭性，同时摧毁基质细胞间的连接，促使乳腺癌细胞突破肿瘤转移屏障向远处转移。本课题将进一步阐明外泌体介导的circ-0076303调控ADAM19的具体机制，探讨circ-0076303作为早期转移性乳腺癌标志物的可行性，探明circRNA作为转移性乳腺癌治疗靶点的可能性。本研究首次提出外泌体介导的circRNA在乳腺癌侵袭转移中的作用，为乳腺癌的研究提供了新思路，并且可能成为转移性乳腺癌治疗的新方向。

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，远处转移是造成乳腺癌患者死亡的主要原因。近些年来，大量研究证实circRNA与乳腺癌的发生发展及侵袭转移密切相关。前期实验中，我们证实了外泌体介导的circ-0076303能促进乳腺癌细胞的侵袭和转移。本课题在实施过程中发现在动物水平circ-0076303的功能有限，因此我们重新挑选3对乳腺癌和癌旁组织进行circRNA测序，重新筛选有功能的circRNA，并在组织和细胞水平重新验证，最终筛选出circ-0004664在细胞和动物水平均能促进乳腺癌的侵袭和转移。因此，本项目将研究内容调整为：① 在细胞和组织水平验证circ-0004664促进乳腺癌侵袭转移；② 从circRNA海绵吸附miRNA的作用机制探索circ-0004664可能吸附的miRNA；③ 探索circ-0004664-miRNA下游调控的靶基因；④ 在动物水平验证circ-0004664通过circRNA-miRNA-protein促进乳腺癌侵袭转移的具体机制；⑤ 探讨抑制circ-0004664表达的基因治疗的可行性。所取得的主要结果：circ-0004664在侵袭性高的乳腺癌细胞株中表达明显高于侵袭性低的乳腺癌细胞株；circ-0004664在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织；过表达circ-0004664的乳腺癌细胞株迁移和侵袭能力明显增强；circ-0004664可能通过吸附miR-4277来调控乳腺癌细胞株的功能。本研究在细胞和组织水平证实circ-0004664参与乳腺癌的侵袭转移，可能通过circ-0004664-miR-4277的机制来发挥作用；；目前动物实验正在进行中。并探讨了circ-0004664成为乳腺癌预后指标的可行性，以及下调circ-0004664实现基因治疗乳腺癌的可行性。本研究探讨了circ-0004664促进乳腺癌侵袭转移的机制，为转移性乳腺癌的研究和治疗提供新思路。