结核分枝杆菌毒力岛基因的定位研究

本研究采用体内表达技术将结核分枝杆菌H37Rv株的随机酶切片段克隆入含有GFP的自杀穿梭载体pMBC167中，构建成融合基因文库。然后将此文库电穿孔入结核分枝杆菌临床分离株中构建成细菌文库，进而用此细菌文库进行巨噬细胞感染实验和感染C57小鼠实验，通过报告基因初步筛选重组子，经过二次筛选后再经过体外报告基因的筛选最终得到含有体内诱导基因（毒力基因）的重组子。最后我们进一步研究这些重组子的生物学特性并通过分子生物学的方法得到这些体内诱导基因的（毒力基因）基因序列，初步确定结核分枝杆菌毒力岛的组成和定位。