神经胶质细胞及其Trk/P75NTR受体在激光辐射眼损伤中的作用机制研究

激光辐射导致的眼损伤已经成为医疗、科研等领域一个不容忽视的问题，视网膜感光神经元的凋亡是视功能受损的主要原因。多种神经营养因子显示了强大的抗神经元凋亡效应，由于感光神经元表面除bFGFR外并无其他种类受体，而视网膜局部的神经胶质细胞（主要是Müller细胞和小胶质细胞）可以分泌bFGF，因此多种神经营养因子可能通过作用于胶质细胞的表面受体（Trk和P75NTR）来调控其bFGF的分泌，最终决定感光神经元命运。本研究在激光造成视网膜损伤的体内和体外模型中，通过免疫组化、PCR、细胞培养、显微切割、RNAi等方法，观察视网膜损伤后Müller和小胶质细胞的功能改变及其所表达的神经营养因子和受体（Trk/P75NTR）在调控感光细胞存活过程中的作用，旨在探讨感光神经元的损伤途径、分析可能的治疗靶点，并通过动物实验加以验证。该项目将为阐明激光及相关电磁辐射致视网膜损伤的分子病理机制提供理论依据。

目前激光已在医疗、科研、军事等领域得到了广泛的应用，由于激光本身的物理特性和人眼屈光系统的生理特点，使得视网膜成为激光生物损伤效应的重要靶器官，而激光视网膜损伤的分子病理机制目前尚不明确。研究表明，视网膜Müller等神经胶质细胞表面的神经营养因子受体（Trk/P75NTR）在视网膜感光神经元的形态发生以及维持视细胞功能等方面都发挥了重要作用，并且介导了bFGF等多种神经营养因子的抗视网膜神经元凋亡效应。在项目基金的资助下，本研究在激光造成的视网膜损伤模型中，揭示了中低剂量的Nd:YAG和Ar+激光在不造成肉眼可见损伤的情况下，即可引起视网膜组织病理结构的变性改变及视细胞的凋亡；发现球后注射外源性bFGF能显著促进感光神经元的分裂增殖和视功能的恢复，从而有效的保护了视网膜感光细胞的结构和功能；在此基础上，进一步探讨了视网膜损伤过程中后神经胶质细胞的功能改变及其在调控感光细胞存活过程中的作用，并观察了神经胶质细胞所表达的神经营养因子受体TrkA、TrkB、TrkC及P75NTR在激光致视网膜感光神经元损伤过程中的重要作用；特别是发现了Müller细胞中的P75NTR受体参与了激光照射后外核层感光神经元凋亡的诱导，而Trk类受体对视网膜中节细胞及双极细胞的修复和重建则发挥着重要的营养作用。本研究结果为激光视网膜损伤分子病理机制的阐明及新的治疗措施的建立提供了理论和实验依据，提示视网膜神经胶质细胞及其受体在激光照射后视网膜的损伤修复中起了关键作用，并有望成为激光视网膜损伤后新的治疗靶点，这也为临床其它视网膜神经细胞退变性疾病的治疗提供了新的策略和理论依据。本项目研究期间发表国内外学术论文16篇，其中SCI论文6篇，EI收录3篇；参加国际和国内学术会议5次，培养博士后及博硕士研究生3名。