水稻重要米香物质2－乙酰基－吡咯啉（2AP）的代谢研究

2－乙酰基－吡咯啉（2AP）是水稻最重要的香味物质。显性基因Badh2阻止2AP产物的积累，表现非香，其所编码的是N端缺少110个氨基酸的甜菜醛脱氢酶（BADH2）。当Badh2基因编码区发生8bp缺失变成隐性基因时，出现2AP的合成，表现米香特性。为证实控制2AP合成的BADH2蛋白的功能，本研究首先用CaMV35S启动子连接三种长度不同的Badh2基因编码框（预测的全长Badh2基因，非香Badh2基因和缺失N端核酸结合功能域的Badh2基因）构建高表达载体，然后导入到香稻'武香粳'受体中。测定转基因后代的2AP含量，明确不同Badh2编码框长度与米香性状的关系。将Badh2三种编码框相对应的cDNA克隆到表达载体中，在大肠杆菌中表达相应的蛋白，检测它们所作用的底物及活性，从而明确2AP合成的前体物质。通过基因芯片杂交、RNAi干扰等方法揭示直接参与2AP合成的基因，阐明其代谢途径。