非编码小RNA在对虾免疫中作用的分子机制

非编码小RNA在生物生长发育、抵抗微生物侵染等方面起非常重要的作用，然而，对于DNA病毒是否诱导RNAi产生及其产生途径、非编码小RNA在免疫调控中的作用等问题，在包括对虾在内的无脊椎动物研究中，至今仍然是有待于进一步探索的重要内容。本项目拟在已有的工作基础上，深入研究非编码小RNA在对虾免疫中作用的分子机制。本项目拟分别从病毒和宿主及其互作入手，一方面阐明病毒尤其是DNA病毒诱导对虾产生非编码小RNA的途径，另一方面研究非编码小RNA在对虾免疫调控中的作用，再进一步研究病毒miRNA对对虾免疫相关基因以及对虾miRNA对病毒基因的调控作用。该项目的研究结果，不仅有利于阐明非编码小RNA在动物先天性免疫调控中的作用以及DNA病毒诱导宿主产生RNAi的途径，而且有利于利用对虾本身的小RNA调控对虾免疫，加强对虾抗病力，促进对虾养殖业的稳定、持续发展。

非编码小RNA在生物生长发育、抵抗微生物侵染等方面起非常重要的作用，但是对于非编码小RNA在病毒-宿主互作中的作用机制，研究较少。本项目从病毒和宿主及其互作入手，主要围绕病毒诱导对虾产生非编码小RNA的途径、非编码小RNA在对虾免疫调控中的作用、病毒和对虾miRNA的相互调控等内容展开研究。结果表明，对虾的细胞吞噬、细胞凋亡、RNAi等在病毒-宿主的互作中发挥重要作用；利用抗病毒的vp28-siRNA进行研究，结果显示包括对虾在内的动物不仅可通过siRNA途径抵抗RNA病毒的侵染，同样可通过siRNA途径抵抗DNA病毒的感染；对虾白斑综合症病毒（WSSV）编码40个不同的病毒的miRNA，80％的WSSV miRNA在病毒感染早期阶段起重要作用，结果说明高密度的病毒miRNA可能极大地促进病毒在宿主环境中的选择性压力下的变异；通过对虾miRNA测序、miRNA芯片分析及功能研究，发现63条对虾miRNA与对虾抵抗WSSV的感染有关，12条对虾miRNA通过调控细胞吞噬在病毒-宿主互作中发挥重要功能，13条对虾miRNA在细胞凋亡中起重要的调控作用且具有抗病毒作用，这些miRNA中，有21条是在哺乳动物中高度保守，表明这些miRNA可能在不同种类的动物中有类似或相同的功能；WSSV感染对虾后，对虾miR-7显著上调表达，miR-7通过调控病毒早期基因的表达，抑制WSSV的复制，从而影响病毒的感染，miR-7在病毒-宿主互作中起重要作用。我们的研究结果，不仅阐明了非编码小RNA在动物先天性免疫调控中的作用以及DNA 病毒诱导宿主产生RNAi的途径，而且有利于利用对虾本身的小RNA调控对虾免疫，加强对虾抗病力，促进对虾养殖业的稳定、持续发展。