ABCB6基因在眼组织缺损中的功能研究

Retinal coloboma is common heriditary eye disease which affected children's vison severely.We have accomplished pathoginetic gene linkage localization of three generations dormiant retinal coloboma family to determine the pathogetic gene is ABCB6 and verified this gene is the new gene which can cause retinal coloboma.ABCB6 konck out zabra fish model were found obvious retinal coloboma.The outcome was published by The American Journal of Human Genetics which attracted attention from whole world.Based on the result,we are going to investigate the relationship between ABCB6 gene and retinal coloboma feature and to study the mutation model and biochemical function in order to clarify mechanism of retinal coloboma

眼组织缺损是眼科常见遗传性眼病，对患儿视觉功能有极大影响。在以往的研究中，我们对一个三代显性遗传性眼组织缺损家系进行致病基因的连锁定位，确定其致病基因为ABCB6，通过对该基因进行进一步的研究，证实该基因为导致眼组织缺损的新基因。利用基因敲除技术，在ABCB6基因敲除的斑马鱼动物模型中可见到明显的眼组织缺损表型。该研究结果在The American Journal of Human Genetics上公布后，引起了国内外相关研究领域学者的普遍关注。因此，本研究拟在此研究的基础上进一步确定ABCB6基因与先天性眼组织缺损疾病表型的关系，并且深入进行该基因的突变体模型及生化功能研究，以期阐明先天性眼组织缺损的发病机制。

眼组织缺损，是一种较为少见的先天性眼科疾病，该病尚无有效的治疗方法，并且会引起诸如眼球震颤、视网膜脱离、视网膜下新生血管等并发症，可造成患者视力的明显下降，危害极为严重。本课题针对研究内容开展了以下研究。.(1)临床搜集到散发先天性脉络膜缺损病例2例，进行了基因筛查，发现导致3个其他突变位点。.(2)利用CRISPR/Cas9技术制作Abcb6基因大片段敲除小鼠的模型，对鼠进行眼前节相、眼底相、造影和OCT检查，与对照组比未发现显著差异。.(3)构建人ABCB6 野生型及突变型表达质粒，筛选出稳定表达细胞株，发现与对照组相比，导入突变型质粒的明显影响细胞增殖。.(4)收集到一个四代常染色体显性遗传性青光眼家系。我们对致病基因的研究发现：家系所有患者PTPRF基因突变：c. G2749A:p.Gly917Ser，家系中正常人均无此突变，初步确定致病基因为PTPRF。通过体内和体外实验证明，PTPRF的突变通过影响自噬导致原发性开角型青光眼，它是可导致POAG的新基因。