基因组不稳定性和表达谱变化预测和诊断肺重复癌的应用价值和分子标记物研究

检测术后病理诊断为肺转移癌标本基因表达，则发现原发癌和转移灶标本之间基因表达相似率低而实为重复癌。导致误诊的主要原因是缺乏有效诊断方法和分子标记，已发现肺重复癌的发生与遗传易感性和DNA损伤有关，血液和肿瘤组织中DNA损伤或易感基因变化，可作为预测或诊断肺重复癌分子标记。本课题拟在以前作基础上，进一步应用免疫组化检测已病理诊断的重复癌标本基因型，再次确认肺重复癌诊断并发现敏感的蛋白标志物。并据此分别应用PCR-SSCP法和CometAssay法分析肺重复癌和转移癌患者外周血单个核细胞DNA损伤和微卫星多态性，同时利用PCR-SSCP和基因芯片技术检测重复癌、转移癌细胞DNA微卫星多态性及基因表达谱的变化。旨在达到从DNA和蛋白水平发现可用于诊断和预测肺重癌分子标记。这些结果将有助于提高日益增加的肺重复癌患者的预测和诊断水平，且也对肺癌的合理化和个体化治疗具有重要临床应用价值。

主要结果:（1）通过免疫组织化学检测p16、p27、p53及c-ErbB2在肺重复癌、转移淋巴结、转移癌及第二重复癌之间的表达水平，结果表明：对于病理类型不同的肺重复癌，肺重复癌灶之间基因表达差异大于原发癌与转移癌；对于病理类型相同的肺重复癌，两个独立癌灶间4个基因表达积分差之和≤90，判断为肺癌肺内转移；当＞90时，应诊断为肺重复癌。（2）微卫星多态性分析表明： 6个微卫星位点标记检测表明肺转移癌和肺重复癌灶均有不同程度的微卫星不稳定性现象和杂合性缺失表现，对于肺转移癌，原发癌灶和转移癌灶之间存在微卫星不稳定性的“单一趋势”。对于肺重复癌，第一个原发癌灶和第二个原发癌灶之间存在微卫星不稳定性的“双向趋势”。（3）外周血有核细胞DNA损伤检测表明：随着肺癌患者病程的发展，外周血DNA损伤程度高的发展成为转移癌的可能性大。而DNA损伤相对较低的发展成为肺重复癌的可能性较大。（4）合适的基因和分子检测有助于诊断肺重复癌或转移癌，但仍需要进一步筛选敏感基因。