Maspin基因表达水平对食道癌细胞代谢表型的影响及机制研究

我们的近期研究已表明maspin表达水平与食道鳞状上皮细胞癌的进展和转移成明显负相关。体外实验证实maspin稳定转染不仅可以抑制食道癌细胞出现上皮间质样转化，而且细胞生长特性出现转变，表现趋向良性表型，提示maspin重新表达使细胞恶性表型发生了逆转。比较蛋白质组学分析显示maspin稳定转染细胞中缺氧诱导因子HIF-1α及一组糖酵解酶的表达明显下调。由此，我们首次提出maspin可能通过调控HIF-1α影响恶性肿瘤细胞的代谢表型，从而引起细胞恶性表型逆转。本项目拟通过观察maspin转染以及maspin沉默的食道癌细胞系在常规及缺氧条件下细胞代谢表型及HIF-1α表达水平的变化、食道癌组织标本maspin与糖酵解酶和HIF-1α的相关性等，验证这一假设。并采用小干扰RNA、共转染、染色质共沉淀（ChIP）等技术手段探寻可能的调控机制和信号通路以进一步阐明maspin转移抑制作用机制。

本项目工作主要目标是验证maspin是否可以影响恶性肿瘤细胞的代谢表型，并试图探寻其可能的调控机制。实验中我们利用maspin稳定表达细胞株和敲减细胞株证实了maspin可通过Akt/AMPK/mTOR信号途径改变肿瘤细胞的高糖酵解代谢表型，逆转缺氧所诱导的HIF-1α升高，明显降低细胞葡糖糖消耗量和乳酸生成量。另外，我们还发现maspin可以浓度依赖的方式一定程度上抑制HIF-1α的转录，其具体的结合位点仍需进一步探讨。