益气解毒颗粒逆转鼻咽癌细胞抗原免疫耐受机制研究

局部复发及远处转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因，这类患者不再适合接受放化疗等常规抗肿瘤治疗措施。虽然肿瘤免疫疗法为此带来了希望，但其疗效强度、维持期限及靶向特异性等问题明显限制了临床应用前景。发展中医药抗肿瘤免疫疗法，有望促进这类晚期鼻咽癌的治疗水平。本项目基于扎实的前期工作成果及近期发展的鼻咽癌细胞抗原提取纯化技术，以有效中药复方益气解毒颗粒为试验因素，从晚期鼻咽癌患者肿瘤微环境DCs成熟状况与Tregs免疫耐受机制研究入手，紧密围绕该类免疫病理轴线，通过分离与浓集DCs与Tregs，分别予益气解毒颗粒药效组分诱导分化并激活功能，继而逐步考证其链式效应功能：始于鼻咽癌细胞抗原性增强并诱导抗原特异性DCs成熟环节，然后促进Tregs重分化为Th17而逆转其免疫耐受机制，再驱动幼稚CD4+T向效应细胞极化，最后激活CD8+T效应活性，达到增强瘤细胞对常规治疗的敏感性并清除体内残留瘤细胞的目的。

观察益气解毒方乙酸乙酯、多糖和乙醇提取物体外抑瘤效应，乙酸乙酯提取物（EAE）以及原方对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的抑瘤效应及其对肿瘤微环境DC功能相关细胞因子分泌活性的影响，益气解毒方有效部位EAE对鼻咽癌患者外周血树突状细胞分化发育及T效应细胞活化的干预效应以及对鼻咽癌患者放疗后生存率的影响。结果显示，乙酸乙酯提取物具有明显的抑瘤作用，且抑瘤率与药物剂量呈明显的正相关关系；益气解毒方有效部位EAE单独应用以及与DDP联合用药都可以显著抑制荷瘤裸鼠移植瘤的生长，有效提高移植瘤组织中IL-12、MHC-Ⅱ、IFN-γ、CD8蛋白表达水平，降低IL-4、 CD4、FoxP3、TGF-β和IL-10表达水平，抑制Tregs生成，促进CD4+T细胞向CD8+T细胞转化，改善微环境中免疫抑制状态来实现抑瘤效应。EAE可以促进体外诱导之鼻咽癌患者外周血DC分化成熟，显著增加DC表面CD1a、CD86和HLA-DR 的表达，促进IL-12的表达和分泌；提高DC诱导的CTL对CNE2细胞的杀伤活性，且具有剂量效应关系。益气解毒养阴方应用于NPC疗后患者的康复治疗，治疗组QOL评分、平均生存时间、总生存率、5年和10年生存率、5年和10年无瘤生存率显著高于对照组，5年复发率和肿瘤复发时间显著低于对照组。该项目从肿瘤微环境免疫耐受现象逆转方面深入探讨了益气解毒方的作用机制，为其临床应用提供了依据。项目研究过程中，发表学术论文15篇，参加国内学术会议4人次，国际学术会议1人次（美国头颈肿瘤学会举办的第八届国际头颈肿瘤学会大会，于2012年7月17~22日在加拿大多伦多举行，论文在大会宣读，并获得基础研究优秀论文1等奖）；培养硕士生4名、博士生4名。