Men1基因调控Wnt/β-catenin信号通路在ACTH非依赖性大结节样肾上腺增生的作用机制研究

Investigation of the genes and signaling pathway involved in adrenocorticotropin-independent macronodular adrenal hyperplasia (AIMAH) has been shown to play a key role in clinical diagnosis and treatment. Activation of Wnt signaling has been implicate in the pathogenesis of AIMAH. Our group has reported than menin affect the proliferation and apoptosis of the cells through Wnt/β-catenin signaling. Based on the previous work, we try to establish the double-knock mice model, tumor samples and clinical resources to system research the role of Men1 gene and the function of Wnt/β-catenin signaling in the adrenocortical cell lines and mice models. Advancement in the understanding of the pathophysiology of AIMAH is essential for the development of more sensitive means of diagnosis and treatment, resulting in better clinical outcome.

研究ACTH非依赖性大结节样肾上腺增生发病的关键基因和信号通路是解决临床诊断和治疗的关键。Wnt信号通路激活被证实与ACTH非依赖性库欣综合征的有着基础、广泛和密切的关系。本研究组已报道menin通过调控Wnt/β-catenin信号通路来影响细胞的增殖和凋亡。在此基础上，本项目建立条件性双基因敲除小鼠等模型，利用组织标本库和临床资源，系统研究Men1基因与Wnt/β-catenin信号通路在肾上腺皮质发育和肾上腺皮质细胞增殖中的作用，探索肾上腺皮质细胞Men1基因与Wnt信号通路的功能及关键靶基因，并研究模型小鼠肾上腺皮质细胞的增殖调控，为ACTH非依赖性大结节样肾上腺增生提供新的机理揭示其调控机制对疾病的影响，探索相关结果在临床诊断、评估和治疗策略中应用的途径。

双侧大结节样肾上腺增生作为肾上腺库欣综合征重要类型，具有激素分泌和肿瘤双重特性，研究其发病机制和关键靶基因是解决临床诊断和治疗的关键。本课题旨在利用组织标本库和临床资源探讨双侧大结节样肾上腺增生分子机制，通过外显子测序筛选关键基因，并探索分子分型在临床诊断和治疗策略中的应用途径。主要成果如下：.1)建立了临床及遗传信息齐全的肾上腺库欣综合征组织标本库，目前入库标本超过300例，从而为进行双侧大结节样肾上腺增生相关研究提供了可靠信息和材料。2)在此基础上，确立了肾上腺库欣综合征尤其是双侧大结节样肾上腺增生的关键基因，与其涉及临床表型和治疗预后相关因素：(1)对分泌皮质醇的肾上腺肿瘤组织进行外显子测序，发现肾上腺皮质腺瘤存在PRKACA热点突变及StAR表达增加，而双侧大结节样肾上腺增生存在DOT1L基因表达异常，提示双侧大结节样肾上腺增生发病机制与其他类型不同；(2)PRKACA、GNAS和PRKAR1A基因突变型肾上腺皮质腺瘤的StAR表达均高于野生型，StAR通过激活下游cAMP/PKA信号通路来促进皮质醇高分泌，提示StAR可作为肾上腺皮质腺瘤cAMP/PKA通路激活型和正常通路活性型的标志物。PKA通路激活型均有着更高激素分泌能力和更小肿瘤体积，与传统以单一基因突变进行分子分型比较更符合实际的临床分型；(3)通过外显子测序方法发现致异位ACTH综合征胸腺肿瘤存在137个体细胞突变基因（15.2个/标本），129个单核苷酸位点突变，HRAS、PAK1和MEN1可作为胸腺神经内分泌肿瘤的候选基因；(4)双侧大结节样肾上腺增生与ARMC5基因突变有关，进一步证实ARMC5基因突变与激素高分泌及手术预后不良有关，提示ARMC5在激素分泌和肿瘤发生中扮演非常重要的角色。 .本研究从遗传水平层面分析肾上腺库欣综合征和异位ACTH综合征，尤其是双侧肾上腺大结节样肾上腺增生的分子机制，揭示了致病关键靶基因，并确立肾上腺皮质腺瘤分子分型和标志物，在此基础上发现并阐明ARMC5基因对临床表型和治疗预后的影响，为临床诊断和治疗策略制定提供参考依据，具有重要应用价值。